论文题目: 棉铃虫核型多角体病毒ORF128、ORF135等基因的特性分析
论文类型: 博士论文
论文专业: 农业昆虫与害虫防治
作者: 安世恒
导师: 张传溪
关键词: 棉铃虫核型多角体病毒,原核表达,真核表达,表达,转录,亚细胞定位,免疫共沉淀
文献来源: 浙江大学
发表年度: 2005
论文摘要: 棉铃虫核型多角体病毒(Heliocoverpa armigern nuclear polyhedrosis virus,HaSNPV)是棉铃虫专一性病原微生物,在害虫生物防治中具有很大的应用前景。随着分子生物学的发展,HaSNPV C1株和G4株的基因组全序列已经测定。目前,有许多基因的功能被了解清楚,例如,polyhedrin、late gene expression factor 2(lef-2)、basic DNA-binding protein(BDBP)、Ha122、Ha94、Ha29、Ha33等,但仍有许多基因的功能是未知的。在这篇论文中,作者分析了几个基因,为下一步功能的分析打下基础。本论文的主要结论如下: 1.HaSNPV ORF128的初步分析 在HaSNPV-C1株基因组中,Ha128位于120,252和121,052 bp之间,编码266个氨基酸残基,预测分子量为30.5 kDa.Ha128的同源蛋白存在于所有已测序的鳞翅目昆虫的杆状病毒中,但没有发现其同源蛋白存在于颗粒体病毒和其他非鳞翅目昆虫的杆状病毒中,因而可能作为鳞翅目NPV特有的一个基因。Northern blot分析发现Ha128的转录本在病毒侵染宿主细胞(HzAMl cells)24 h后被检测出来,一直持续到122 h仍能被检测出来。利用自制的抗体进行western blot分析发现,Ha128基因表达的蛋白在病毒侵染宿主后24 h被检测出来,一直持续到120 h仍能检测出来,这些结果说明在病毒感染宿主的过程中Ha128是一个晚期表达的基因。Western blot也发现Ha128基因的表达产物大约是31 kDa,与预期的大小相一致,说明Ha128基因的表达产物没有经过大的后加工修饰。免疫荧光分析发现Ha128主要位于宿主细胞的细胞质中。Pull-down和免疫共沉淀分析发现至少有两个宿主蛋白可以与Ha128蛋白互作。总之,Ha128是一个晚期表达的基因,表达的产物位于宿主细胞的细胞质中,可能直接与宿主蛋白进行互作。 2.Ha128同源基因苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)ORF17的初步分析 AcMNPV是昆虫杆状病毒研究中的一个模式种,AcMNPV ORF17(Ac17)是鳞翅目NPV的一个核心基因,是Ha128的同源基因。计算机分析显示,在Ac17基因编码的氨基酸序列中发现一个casein kinase Ⅱ phosphorylation位点(位于aa 69-72)、两个N-glycosylation位点(位于aa 78-81,158-161)和一个N-myristoylation位点(位于aa 151-156),但没有其他任何显著的motif被发现。RT-PCR分析揭示Ac17的转录本在病毒侵染宿主后3 h就能被检测出
论文目录:
致谢
中文摘要
第一部分 文献综述及本研究的内容和技术路线
第一章 昆虫杆状病毒的分子生物学研究进展
第二章 研究内容与技术路线
第二部分 棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV) ORF128的初步分析
第三章 HaSNPV ORF128的序列分析
第四章 HaSNPV ORF128在大肠杆菌中的表达及抗体的制备
第五章 HaSNPV ORF128在Bac-to-Bac系统中的表达
第六章 HaSNPV ORF128特性的初步分析
第三部分 HaSNPV ORF128同源基因AcMNPV ORF17的初步分析
第七章 HaSNPV ORF128同源基因AcMNPV ORF17的初步分析
第四部分 棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV) ORF135的初步分析
第八章 HaSNPV ORF135的初步分析
第五部分 棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV) ORF99、ORF102、ORF101及P6.9基因昆虫细胞中的表达及亚细胞定位
第九章 棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV) ORF99、ORF102、ORF101及P6.9基因在昆虫细胞中的表达及亚细胞定位
全文小结
参考文献
英文摘要
附录 博士期间所发的文章
发布时间: 2005-07-22
参考文献
- [1].棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株的部分基因组克隆载体的构建与序列分析[D]. 赵光日.武汉大学2003
- [2].棉铃虫核型多角体病毒侵染机制的研究[D]. 吕颂雅.武汉大学2003
- [3].棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒（HearSNPV）ORF5、ORF28和ORF29基因分析[D]. 郭忠建.浙江大学2005
- [4].棉铃虫核型多角体病毒（HearSNPV）ORF33、ORF80、ORF81和ORF83基因分析[D]. 王敦.浙江大学2005
- [5].IrfaNPV和OrerNPV生物学与分子特性研究[D]. 杨丽荣.浙江大学2006
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标签：棉铃虫核型多角体病毒论文; 原核表达论文; 真核表达论文; 表达论文; 转录论文; 亚细胞定位论文; 免疫共沉淀论文;