二苯乙烯苷对氧化损伤人脐静脉内皮细胞NF-κB/IκB表达的影响

论文摘要

目的:研究二苯乙烯苷对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用,探讨TSG保护内皮细胞的作用机制。方法:对体外培养人脐静脉内皮细胞给予不同浓度H2O2刺激,MTT法筛选造成HUVEC氧化损伤的H2O2浓度,检测TSG对氧化损伤的HUVEC细胞活性的影响。用不同浓度的TSG预处理HUVEC 4h后,加200μmol/L H2O2作用24h,运用RT-PCR检测NF-κB、IκB、TNF-α、IL-6 mRNA表达,免疫印迹检测NF-κB、IκB蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测上清中TNF-α、IL-6蛋白表达。结果: MTT法筛选200μmol/L为H2O2损伤作用浓度,细胞增殖率结果显示,与H2O2（200μmol/L）损伤组比较,0.1、1、10μmol/L TSG加H2O2处理组细胞的增殖率都显著增加（P<0.01）。对炎症应答相关基因的初步研究显示,与H2O2损伤组比较,0.1、1、10μmol/L TSG加H2O2处理组NF-κB mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,1μmol/L TSG加H2O2处理组蛋白表达有统计学意义;TNF-αmRNA及蛋白水平有不同程度降低,其中1μmol/L TSG加H2O2处理组mRNA表达显著降低（P<0.01）;各组IκB、IL-6 mRNA及蛋白表达差异无显著性。结论:TSG可能通过抑制NF-κB的活化而降低炎性因子的表达,保护HUVEC。

论文目录

• 英文缩写词索引
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 实验材料
• 1.1 材料
• 1.2 主要试剂
• 1.3 仪器设备
• 2 实验方法
• 2.1 人脐静脉内皮细胞的培养
• 2.2 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC 细胞活性的影响
• 2.3 细胞总RNA 的提取、定量和RNA 的完整性分析
• 2.4 RT-PCR 检测NF-κB、IκB、TNF-α、IL-6 mRNA 表达
• 2.5 Western-blotting 印迹法检测NF-κB、IκB 蛋白表达
• 2.6 ELISA 法检测细胞TNF-α、IL-6 蛋白表达
• 2.7 统计处理
• 3 实验结果
• 3.1 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC 细胞活性的影响
• 3.2 二苯乙烯苷对氧化损伤 HUVEC NF-κB、IκB、TNF-α、IL-6 mRNA 表达的影响
• 3.3 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC NF-κB、IκB、TNF-α、IL-6 蛋白表达的影响
• 4 讨论
• 4.1 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC 细胞活性的影响
• 4.2 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC 核转录因子表达的影响
• 4.3 二苯乙烯苷对氧化损伤HUVEC 炎性因子表达的影响
• 5 结论
• 参考文献
• 综述
• 在读期间科研成果简介
• 致谢