导读:本文包含了功能性重组论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:功能性食品,教学内容重组,实施
功能性重组论文文献综述
傅维[1]（2018）在《“功能性食品”课程教学内容重组的研究与实施》一文中研究指出"功能性食品"课程是食品营养与检测专业的核心课程,主要研究"功能性食品"课程现状、教学项目的重组、教学项目的实施等。针对现有教学现状,对"功能性食品"课程的教学内容进行重组,改变原有的教学方法,对教学评价进行改革并实施。(本文来源于《农产品加工》期刊2018年24期）
纪洪帅,郭锦瑞,杨颖,毛伟平[2]（2018）在《抗B7-H4-scFv/PE38KDEL重组免疫毒素的表达和功能性检测》一文中研究指出目的:构建基于抗B7-H4单链抗体(sc Fv)的重组毒素anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,检测毒素蛋白的抗肿瘤作用。方法:通过重迭延伸PCR(SOE-PCR)技术将anti-B7-H4-scFv基因和毒素PE38KDEL基因进行连接,重组基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达,蛋白经变复性和镍柱亲和层析(Ni-NTA)纯化后进行Western blot鉴定;间接ELISA和流式分析技术进行特异性鉴定。利用MTT法和皮下移植瘤模型实验,检测毒素对体外、内肿瘤细胞的抑制作用,并对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化分析。结果:酶联后得到重组表达载体pET28a-anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,纯化后的毒素蛋白对肿瘤细胞具有一定杀伤力,并且在肿瘤模型实验中能抑制体内肿瘤的生长。结论:成功构建了基于抗B7-H4单链抗体的重组毒素表达体系,经鉴定重组毒素蛋白有良好的生物学功能活性和抗肿瘤活性。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2018年03期）
纪洪帅[3]（2018）在《抗B7-H4-scFv/PE38KDEL重组免疫毒素的表达和功能性检测》一文中研究指出本研究通过SOE-PCR技术将抗B7-H4单链抗体基因与毒素PE38KDEL基因进行连接,将得到的重组免疫毒素基因anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL亚克隆到原核表达载体pET28a中诱导表达。重组免疫毒素先通过变复性得到可溶蛋白,在经过镍柱纯化得到较单一的目的蛋白,并用免疫印迹鉴定蛋白的表达情况;后分别利用间接ELISA、流式细胞术和Western blot检测重组蛋白与B7-H4抗原的结合活性;通过MTT法和皮下异种移植瘤模型实验,检测毒素蛋白对体外、内肿瘤细胞的抑制作用,处死荷瘤鼠后,解剖瘤块并对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化分析。具体实验流程如下:1、重组免疫毒素anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL基因的扩增、克隆和重组表达载体 pET28a/anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL 的构建先分别扩增出单链抗体anti-B7-H4-scFv基因和修饰后的毒素PE38KDEL基因,再利用SOE-PCR技术将这两段基因连接。PCR反应结束后,将目的条带进行割胶回收。将回收的目的基因anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL与pUM19-T Vector按照试剂盒进行T-A克隆,保留测序结果正确的菌株。用EcoRⅠ和NotⅠ限制性内切酶对pET28a(+)质粒和anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL基因进行双酶切。所得的连接产物转化到大肠杆菌感受态细胞中,涂含抗生素的平板进行筛选,次日挑取平板上长出的阳性克隆送测鉴定,测序正确的阳性菌株-80 ℃保存。2、重组免疫毒素Anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL的表达、纯化及活性检测将含有正确 pET28a/anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL 重组载体质粒的 BL21(DE3)表达菌株在不同条件下诱导表达。利用SDS-PAGE分析蛋白在不同条件下的表达情况,并找出最优表达条件。在最优的条件下扩大培养并收集产物,将所得的包涵体沉淀进行变复性处理,以获得更多的可溶性上清。表达产物带有His标签可与镍柱结合,以此纯化蛋白,并用不同浓度的咪唑洗脱并收集洗脱液。把洗脱的蛋白液进行透析,浓缩,收集及鉴定。间接ELISA鉴定重组毒素蛋白和B7-H4抗原蛋白的亲和活性;采用间接荧光标记的方法,运用流式细胞术检测免疫毒素对人源乳腺癌细胞MCF-7、正常人肾皮细胞293a和人源肝癌细胞HepG2这3种细胞的结合活性。3、重组毒素蛋白Anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL在体外和体内的生物学功能鉴定分别从体内和体外两部分实验检测重组毒素蛋白的生物学功能,体外利用MTT 实验在 5 个浓度梯度(0.01、0.10、1.00、10、100ug/ml)下,分别在 12h、24h、36h和48h测定重组毒素对B7-H4抗原高表达的肺癌细胞A549、少表达的肝癌细胞HepG2和不表达的正常细胞293T细这叁种细胞增殖的影响。利用台盼蓝染色检测毒素蛋白(0.01、1.00、100 ug/ml)对MCF-7、HepG2、293a叁种细胞的作用,并计算存活率。体内实验建立小鼠肿瘤异种移植模型,将人源肺癌A549细胞调整到一定数量注射到小鼠皮下建立模型,待瘤长到一定大小时,随机分为空白对照组、阳性对照组和实验组,空白对照组注射生理盐水,阳性对照组注射紫杉醇,实验组注射抗体蛋白,连续隔天给药,一共注射七次,期间记录小鼠体重和肿瘤体积变化。最后处死荷瘤鼠,对取出的瘤组织进行称重、固定,并进行HE染色和免疫组织化学分析。(本文来源于《南京师范大学》期刊2018-03-19）
周恒,杨柳扬,杨峰,章金勇,邹金桃[4]（2018）在《重组金黄色葡萄球菌疫苗免疫血清中功能性抗体OPK检测方法的建立》一文中研究指出目的建立重组金黄色葡萄球菌疫苗免疫血清中功能性抗体检测方法。方法在参考美国阿拉巴马大学的多重调理吞噬实验(UAB-MOPA)方法的基础上,构建并鉴定HL-60效应细胞库及金黄色葡萄球菌工作种子批,完成补体浓度、调理和吞噬孵育时间及血清预稀释倍数等关键实验参数的优选。在此基础上对5种不同来源金黄色葡萄球菌进行调理吞噬杀菌(OPK)活性的检测。结果 HL-60细胞经0.8%DMF诱导分化4 d后,CD35表达量为87.1%,CD71表达量为2.82%,活细胞比例为75.7%;靶细菌工作种子批冻存复活率>90%,工作稀释度>1 000;体系中补体终浓度确定为6%;选择30 min、60 min作为调理和吞噬孵育时间;血清预稀释倍数为2倍;疫苗免疫血清对5种不同来源的金黄色葡萄球菌均表现出良好的OPK活性及标准的"S"型杀菌曲线。结论本研究优化建立的OPK检测方法,可有效评价重组金黄色葡萄球菌疫苗的体外功能性抗体水平,为疫苗临床试验样本检测及免疫有效性替代终点的确立提供了重要的技术支撑。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2018年03期）
刘紫欣[5]（2017）在《功能性贸易服务平台与中小企业贸易流程重组》一文中研究指出随着我国对于外贸经营权的放松,外贸行业发生了巨大的变化,在过去,国有企业占据了市场主体地位,对外贸市场处于垄断局面,而随着自由竞争的市场的逐步发展,一大批中小企业开始涉足外贸。但诸多不稳定因素给中小外贸企业的可持续发展带来了挑战,功能性贸易服务平台作为一种创新性的商业模式,通过对中小企业业务流程进行影响,能够有效地解决中小企业出口难题和困境,特别是在于降低中小企业外贸成本,突破中小外贸企业融资难题方面效果显着。这一新兴业态的发展,对于扭转严峻的外贸形势,增强中小外贸企业的国际竞争力,促进国民经济可持续发展有着极其重要的影响。本文在文献综述的基础上,分析了功能性贸易服务平台与传统贸易企业之间的差异,通过对功能性贸易服务平台给中小企业所带来的创新作为切入点,联系贸易产业生态系统的理论,结合一达通案例,揭示了功能性贸易服务平台对于中小外贸企业业务流程产生的影响,功能性贸易服务平台改变了传统中小企业的业务流程,对于其业务流程进行了优化,并对于未来进行了展望。(本文来源于《暨南大学》期刊2017-06-30）
张亚[6]（2016）在《初级体表感觉皮层功能性重组的研究》一文中研究指出“可塑性”这一概念最早产生于医学界,被引入认知神经科学领域后,其意义得到拓宽,主要是指外在环境和自身条件的变化,比如学习、经验、受伤等,使大脑发生的改变。大脑可塑性贯穿人的一生。主要表现在结构和功能重组两个方面。结构上的可塑性可以发生在大脑皮层、神经元环路等区域,具体涉及皮层厚度、皮层面积,树突长度、树突棘密度和神经元数量等方面。而功能重组则可能表现为神经元水平上突触连接的改变、皮层表征区域功能重组和神经网络水平上不同感觉的跨通道连接。已有研究表明,某些疾病的成因与大脑可塑性密切相关,比如初级体表感觉皮层(the primary somatosensory cortex,S1)和临床疼痛之间就有着紧密的关系。fMRI和EEG等技术的发展又为观察这种关系的变化提供了较为准确的方法,因而大脑皮层可塑性成为认知神经科学领域研究的重要课题。“幻肢感”是一种截肢后的并发症,主要是指截肢后病人感觉被截肢的部位仍然存在。幻肢痛指的是幻肢有疼痛感,包括跳疼、灼烧疼、强烈的痉挛等。需要注意的是,这种感觉并不是病人的一种妄想,而是一种错觉。在某些皮层重组的案例中,如果我们触碰某些体表位置,可能会诱发幻肢感,这些区域称之为“触发区”。触觉、温觉、针刺、流淌、抚摸都能诱发幻肢感。幻肢痛的病理机制目前尚不清楚。被人们广泛接受的有大脑皮质重组。很多研究已经表明初级体表感觉皮层重组有可能是导致幻肢痛的重要原因。初级体表感觉皮层重组的程度越高,那么幻肢痛的疼痛就可能越强。因而幻肢痛患者是研究初级体表感觉皮层可塑性的理想对象。虽然刚开始对可塑性的研究集中在身体受损的患者身上,但是正常人大脑可塑性也是存在的,主要受学习、训练的影响。其发生区域可以在大脑皮层初级体表感觉皮层、初级运动皮层、听觉皮层、视觉皮层等等。我们试图通过对比幻肢痛患者和正常人在同样的任务态下初级体表感觉皮层的激活情况证明幻肢痛和初级体表感觉皮层功能重组关系的稳定性。探讨长期的幻肢痛是否是截肢侧对应的s1对疼痛相关内容敏感性增强的主要原因。在疼痛的研究方法中,激光刺激器诱发的eeg响应,也被称为激光诱发电位(laser-evokedpotentials,leps)是目前被广泛接受的评估疼痛电生理特征最好的方式。eeg自身无创伤性、成本低廉、时间分辨率高,而激光刺激器给出的刺激不仅刺激时间短暂、定位准确、强度可调节、无创伤而且还可以选择性诱发aδ纤维和c纤维神经梢。低强度的躯体感觉刺激,如经皮电神经刺激,诱发的脑电(electroencephalography,eeg)响应,也被称为体感诱发电位(somatosensory-evokedpotentials,seps)。它能够激活较大的神经纤维aβ,通过复杂的传导通路传入大脑皮层后诱发seps。aβ纤维、aδ纤维、c纤维在传导速度、直径、作用上各有差异。aβ是大的髓鞘化纤维,直径约为35~75μm,传导速度约为5~30m/s,主要负责非伤害性传入神经冲动的传导,但也会参与疼痛的调节,aδ纤维是一种小的髓鞘化纤维,直径约为1~5μm,传导速度约为6~12m/s,对伤害刺激和伤害反射的定位有很大作用;最后,c纤维是小的无髓鞘化纤维,直径约为0.2~1.5μm,传导速度约为0.5~2m/s,也会传导伤害性传入神经冲动,但是由于它们的传导速度很低,主要作用是保护疼痛区域免受进一步伤害。相较于正常的leps和seps,非正常的leps和seps振幅、潜伏期都有明显差异。因此我们用leps检测疼痛躯体感觉通路的完整性,而用seps检测非疼痛躯体感觉通路的完整性。功能性磁共振成像(functionalmagneticresonanceimaging,fmri)虽然时间分辨率低,但是空间分辨率高,可以与脑电互补,也是疼痛研究的重要技术。在本实验中,采用的刺激为激光刺激和疼痛共情图片(用棉签或者针刺激左右手)。要参与疼痛感知的主要大脑区域有s1、次级躯体感觉皮层(thesecondarysomatosensorycortex,s2)、前部扣带皮层(theanteriorcingulatecortex,acc)、前脑岛(theanteriorinsula,ai)以及脑侧裂。而疼痛共情是一种能够感受别人疼痛的能力。通过疼痛共情的方式同样能够激活大脑与疼痛的相关脑区比如acc、ai、s1等。我们预期在同样的疼痛共情任务下,正常人处理疼痛信息的脑功能没有发生改变。而长期的幻肢痛是导致截肢侧对应的s1对疼痛相关内容敏感性增强的主要原因。本研究包括两个实验。实验一对象为一名有21年幻肢痛的患者,采用的技术为eeg和fmri,fmri实验刺激为激光刺激和疼痛共情图片。eeg数据表明将激光刺激和电刺激作用在健康侧肩部时,leps和teps呈现得比较清楚。而如果刺激截肢侧肩部,则有很大不同。通过对比健康侧和截肢侧的eeg结果,表明幻肢痛的健康侧疼痛和非疼痛躯体感觉通路都是完整的,而截肢侧则存在缺陷。fmri数据表明当用laser激光刺激被试右手手背,同侧s1、小脑都有明显的激活。相对于非疼痛图片刺激,疼痛图片刺激下和视觉有关的大脑区域、前部和中部扣带回、截肢侧对侧的S1都有明显激活。进一步ROI分析显示左侧S1 BOLD信号的变化率并不受刺激手的类型、刺激的模态和他们相互作用的影响。而右侧S1 BOLD信号的变化率相对于左侧的触碰受左侧的疼痛变化更加明显,右侧的疼痛和右侧的触碰并没有明显的差别。这个发现暗示着截肢侧对侧的S1对疼痛相关的内容敏感性提高。实验二对象为16名成人被试,年龄从39-61岁(M=48.8,S.D.=5.8),采用的技术为fMRI,实验刺激采用激光刺激以及与实验一相同的共情图片。fMRI结果表明,当用激光刺激被试右手手背,对侧S1、脑岛有明显激活。fMRI结果表明,在PL、PR、TL和TR四种条件下,S1、枕叶、MCC都有明显激活。疼痛动态图和非疼痛动态图刺激下的大脑激活没有任何的差异。S1、枕叶以及MCC的激活表明被试可以正常的接受疼痛和视觉信息刺激,进一步的ROI分析表明左侧S1并不会因为刺激手的不同,刺激模态的不同而被显着的调节,同时,他们相互作用也不显着。右侧S1也是如此。这些结果表明正常人的大脑可塑性是存在的,主要跟学习、经验等因素有关,但是正常人处理疼痛信息的脑功能并不会因此发生改变。从而证明了幻肢痛患者S1(被截肢侧)对疼痛敏感性的增加并不是因为实验材料,幻肢痛和S1功能性重组有着密切的联系,长期的疼痛有可能是S1出现功能性重组的主要原因。如果这是持续性疼痛一种异常的神经信号特征,那么我们就可以通过神经生理的手段较为精确的测量持续性疼痛。考虑到身体受伤后神经可塑性能够被迅速发现,我们推测即使在那些幻肢痛史少于21年的患者身上也能发现S1对于疼痛相关和截肢相关内容敏感性的提高,特别是那些更加年轻的病人。当然,我们结论的信度和效度需要用很多的幻肢痛病人和正常人的神经生理数据的支撑。但是也许我们的方法在未来可以用于评估幻肢痛患者神经可塑性水平。(本文来源于《西南大学》期刊2016-04-21）
陈秋霞[7]（2015）在《大肠杆菌高表达携带功能性小RNA的重组RNA方法的建立》一文中研究指出小RNA是指一类小片段的非编码RNA,主要通过RNA-RNA相互作用而对目标RNA进行调控,其中最重要和被广泛研究的作用即RNAi。RNAi是指由RNA分子介导的基因抑制,其包含了两大类RNA分子:microRNA和siRNA。microRNA是一类内源性的～22 nt的非编码小RNA,在生物体中广泛存在并具有高度的保守性,主要通过与mRNA的3'UTR结合,抑制基因翻译或者诱导mRNA的降解。siRNA是一类外源性或人工合成的～22 nt的非编码小RNA,其作用机制与microRNA相似,但可与目标mRNA的任意部位结合并介导mRNA的降解。RNAi在基因功能研究和疾病治疗方面都有广泛的应用,目前已有多种基于RNAi的药物进入临床试验。RNA适配体(RNA aptamer)是指能与给定的特定分子相结合的小片段的RNA,主要通过体外 SELEX(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)筛选而成。由于RNA适配体对其目标分子具有高度的特异性和亲和性,因而在生物化学的研究和疾病的治疗中有着广阔的应用前景,且已有RNA适配体(Pegaptanib)被美国食品药品监督管理局批准。目前用于RNAi和适配体研究的RNA试剂,主要采用化学或体外转录合成,成本较高。本课题通过生物技术的方法,成功构建OnRS(optimal noncoding RNA scaffold)骨架,并用于在大肠杆菌中高表达了具有生物学功能的microRNA,siRNA和RNA适配体,为RNA的研究提供了一种经济快捷高效的合成手段。1.OnRS骨架的构建通过tRNA支架在大肠杆菌中大量表达RNA已有报道,本章旨在构建含有不同的microRNA前体片段的质粒,通过转化大肠杆菌来表达不同的microRNA前体。首先利用人的基因组DNA为模板,根据不同的microRNA前体的序列设计不同的引物以扩增前体片段,采用无缝克隆(seamless cloning)的方法分别构建表达各个microRNA前体的质粒。将构建好的质粒测序验证后,转化大肠杆菌进行RNA的表达,提取细菌中的总RNA,通过变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶电泳鉴定目标的microRNA前体在细菌总RNA中的表达量,结果显示,除了 tRNA/mir-34a,tRNA/mir-125b-1和tRNA/mir-1291之外,其余重组RNA在细菌总RNA中的表达量相当低,有的甚至没有表达。由于在所测定的11个microRNA前体的表达中,mir-34a的表达量最高,为了用这个系统大量表达其他的microRNA,我们采用不同microRNA的成熟序列替换microRNA 34a前体中miR-34a,再根据microRNA 34a前体中的碱基配对方式同时改变其3'序列,并将这个新的结构命名为OnRS。2.OnRS 高表达 microRNA(OnRS/miR-124)及功能研究本章利用OnRS的原理,将miR-124的序列替换microRNA34a前体中miR-34a的序列拟构建能在大肠杆菌中表达含有miR-124序列的重组RNA的质粒OnRS/miR-124,并同时插入一段随机序列构建一个实验所需的对照质粒OnRS/Neg。将构建好的质粒测序鉴定后,转化大肠杆菌,提取总RNA,电泳鉴定,结果显示目的RNA能在大肠杆菌中大量表达。用FPLC(fast protein liquid chromatography)纯化目的重组RNA后,将OnRS/miR-124转染A549细胞,两天后收集细胞,提取总RNA,进行小RNA的深度测序。测序结果表明,OnRS/miR-124能在细胞中被加工产生成熟的miR-124,细胞中其余小RNA的表达未发生明显变化,同时OnRS/miR-124中的tRNA也能在细胞中被加工成tRFs(tRNA fragments),且不同重组RNA之间tRFs的量无明显差异。确定OnRS/miR-124能在细胞中产生出大量成熟的miR-124序列后,进一步对其功能进行鉴定。结果表明,miR-124的靶蛋白STAT3和p-STAT3能被OnRS/miR-124所抑制,且OnRS/miR-124能够抑制细胞的增殖,同时诱导细胞凋亡,与文献报道相符合。上述结果表明,利用OnRS能够成功在大肠杆菌中表达具有生物学功能的microRNA。3.OnRS 高表达 siRNA(OnRS/GFP-siRNA)及功能研究确定OnRS能够成功表达microRNA后,鉴于microRNA和siRNA有着相似的作用机制,本课题进一步探索其是否能用于siRNA的表达。本章利用OnRS的原理,设计并构建了能表达一段22nt的GFP-siRNA的质粒OnRS/GFP-siRNA,质粒通过测序鉴定正确后,转化大肠杆菌,提取总RNA,经电泳鉴定,结果表明重组RNA在大肠杆菌中大量表达。通过FPLC纯化后,将OnRS/GFP-siRNA转染ES-2 GFP细胞,两天后提取总RNA进行小RNA的深度测度。测序结果表明OnRS/GFP-siRNA能在细胞中被加工产生成熟的GFP-siRNA,细胞中其余小RNA的表达未发生明显变化,OnRS/GFP-siRNA中的tRNA也能在细胞中被加工成tRFs,且不同重组RNA之间tRFs的量无明显差异。同时,OnRS/GFP-siRNA转染ES-2 GFP细胞,48 h及72 h之后都能发现和对照组相比细胞的荧光强度明显降低,转染72 h后测定GFP的mRNA表达同对照组相比明显降低。在确定OnRS/GFP-siRNA体外能有效抑制GFP的表达之后,进一步进行了体内实验的验证。对于高表达GFP的转基因小鼠静脉注射OnRS/GFP-siRNA和对照的OnRS/Heg,取小鼠肝脏,冷冻切片,观察OnRS/GFP-siRNA比对照组荧光强度明显降低,同时测定肝脏中GFPmRNA的表达与对照组相比也有显着降低。上述结果表明,利用OnRS能够成功在大肠杆菌中表达具有生物学功能的siRNA。4.OnRS高表达适配体(OnRS/MGA)及其在RNase活性测定中的应用研究本章进一步探索是否能利用OnRS表达功能性的RNA适配体。根据文献设计了能在OnRS的5'端或3'端表达孔雀石绿(malachitegreen,MG)适配体(MGA)的质粒OnRS/MGA5和OnRS/MGA3。转化细菌后提取总RNA鉴定,OnRS/MGA5和OnRS/MGA3都能在大肠杆菌中大量表达且能与MG结合皆能使MG的最大吸收从618 nm转移到630 nm,同时也能增强MG在630/655nm处的荧光。在确定OnRS能成功表达出功能性的MGA后,进一步考察了 OnRS/MGA5在测定核糖核酸酶活性方面的应用。首先确定荧光强度能随着MG和OnRS/MGA5浓度的增加而不断升高。同时,OnRS/MGA5能被人体中主要的核糖核酸酶RNaseA和血管生成素(Angiogenin)所降解。在确定OnRS/MGA5能被核糖核酸酶降解后,由于血清中富含多种核糖核酸酶,故进一步测定血清对OnRS/MGA5的降解。结果发现,OnRS/MGA5能被血清中的核糖核酸酶所降解,且荧光值与血清的量之间呈现经典的剂量-效应关系,同时加入核糖核酸酶抑制剂可使OnRS/MGA5与MG结合的荧光值保持不变。另外,基因传递试剂in vivo-jetPEI也能有效抑制血清中核糖核酸酶对OnRS/MGA5的降解。因此,拟采用OnRS/MGA5作为一个无标记的底物来测定不同病人血清样品中Rnase的活性。测定发现,胰腺癌病人血清中核糖核酸酶的活力(196±22)明显高于良性或正常人(118 ±8)。这为胰腺癌临床诊断也提供了一定依据。(本文来源于《浙江大学》期刊2015-04-01）
何永吉,刘进平,李颖君,王兰[8]（2014）在《华溪蟹功能性重组金属硫蛋白的表达及抗血清制备》一文中研究指出采用SUMO融合表达系统表达河南华溪蟹金属硫蛋白(Metallothionein,MT),经Ni离子螯合柱分离纯化后,用SDS-PAGE、紫外光谱扫描鉴定,并对重组MT的金属结合及清除自由基能力进行了检测.同时,利用纯化的融合蛋白SUMO-MT免疫BALB/c小鼠制备抗血清,间接ELISA检测该抗血清的效价,Western blot和免疫组化染色检测其特异性.结果表明,河南华溪蟹MT以可溶形式获得表达,经金属螯合层析纯化后分析仍具有金属结合特性和清除羟自由基的生物学功能.免疫BALB/c小鼠后获得特异性的抗MT抗血清,该抗血清具有较高的效价和良好的特异性,可识别组织MT,用于免疫组化分析.(本文来源于《环境科学学报》期刊2014年09期）
李银凤[9]（2014）在《“室内重组竹功能性装饰材关键技术研究与示范”通过验收》一文中研究指出2013年11月15日,由浙江大庄实业集团有限公司主持承担,圣象集团有限公司和国家林业局竹子研究开发中心共同参与完成的"室内重组竹功能性装饰材关键技术研究与示范"通过验收。该项技术针对重组竹地板产品在干湿环境下的开裂、起皱、变形,以及产品阻燃等难题进行研究,解决了重组竹地板产品干湿环境下的开裂和起皱问题,产品达到LY/T 1700—2007《地采暖用木质地板》的要(本文来源于《中国人造板》期刊2014年01期）
敖敏,邹国彪,何刚[10]（2013）在《基因重组人表皮生长因子凝胶在功能性鼻内窥镜术后鼻腔创面愈合中的应用》一文中研究指出目的观察基因重组人表皮生长因子凝胶(recombinant human epidermal growth factor gel,rhEGF)在功能性鼻内窥镜(functional endoscopic sinus surgery,FESS)术后鼻腔创面愈合中的应用效果。方法随机将60例FESS术后患者分为两组,30例使用rhEGF涂布创面的患者为试验组,其余30例未使用rhEGF的患者为对照组。观察两组患者创面愈合情况、切口疼痛程度、疼痛持续时间及并发症(切口感染、出血、血肿、囊泡、肉芽、息肉生长和纤维结缔组织增生、鼻腔粘连)情况。结果试验组创面愈合明显短于对照组(P<0.001),试验组创面疼痛程度更轻(P<0.001),疼痛持续时间更短(P<0.001),并发症明显少于对照组(P<0.005),未发现不良反应。结论在FESS术后创面恢复时使用rhEGF,能有效地促进和加快创面愈合,效果好,安全可靠。(本文来源于《西部医学》期刊2013年11期）
功能性重组论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建基于抗B7-H4单链抗体(sc Fv)的重组毒素anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,检测毒素蛋白的抗肿瘤作用。方法:通过重迭延伸PCR(SOE-PCR)技术将anti-B7-H4-scFv基因和毒素PE38KDEL基因进行连接,重组基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达,蛋白经变复性和镍柱亲和层析(Ni-NTA)纯化后进行Western blot鉴定;间接ELISA和流式分析技术进行特异性鉴定。利用MTT法和皮下移植瘤模型实验,检测毒素对体外、内肿瘤细胞的抑制作用,并对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化分析。结果:酶联后得到重组表达载体pET28a-anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,纯化后的毒素蛋白对肿瘤细胞具有一定杀伤力,并且在肿瘤模型实验中能抑制体内肿瘤的生长。结论:成功构建了基于抗B7-H4单链抗体的重组毒素表达体系,经鉴定重组毒素蛋白有良好的生物学功能活性和抗肿瘤活性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
功能性重组论文参考文献
[1].傅维.“功能性食品”课程教学内容重组的研究与实施[J].农产品加工.2018
[2].纪洪帅,郭锦瑞,杨颖,毛伟平.抗B7-H4-scFv/PE38KDEL重组免疫毒素的表达和功能性检测[J].中国免疫学杂志.2018
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