论文摘要
目的: 研究针对β-catenin、C-myc 基因的反义寡核苷酸对VEGF 表达水平的影响,探讨SMMC7721 肝癌细胞株中VEGF 的表达是否受到C-myc 基因的调控以及针对β-catenin、C-myc 的反义基因治疗在肝癌基因治疗中的应用前景。方法:(1)常规培养肝癌SMMC7721 细胞株并接种于6 孔板。(2)根据Genebank 收录的β-catenin、C-myc mRNA 序列设计针对翻译起始部位的反义寡核苷酸。(3)分别用针对β-catenin 翻译起始部位的反义、错配寡核苷酸以及针对C-myc 翻译起始部位的反义、错配寡核苷酸处理细胞,同时设空白对照组,缺氧条件下培养24 小时后收集细胞提取总RNA。(4)用RT-PCR 方法及FR200 图像分析系统半定量分析β-catenin、C-myc 及VEGF 的相对表达量,以β-actin表达为各基因表达的内对照。(5)应用X2检验进行数据统计学分析。结果: (1)针对β-catenin 翻译起始部位的反义寡核苷酸明显抑制β-catenin mRNA的表达,反义组和错义组抑制率分别为0.73±0.06 和0.10±0.07。同时VEGF 的表达也受到了抑制,VEGF 的抑制率为0.80±0.05 和0.09±0.06。(2)针对C-myc 翻译起始部位的反义寡核苷酸抑制C-myc mRNA 的表达,反义组和错义组抑制率分别为0.75±0.04和0.11±0.05,同时VEGF的表达也受到了抑制,VEGF 的抑制率分别为: 0.60±0.07 和0.08±0.03。结论:(1)我们根据Genebank 收录的β-catenin、C-myc mRNA