论文题目: 长白白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备及性质研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 微生物与生化药学
作者: 彭云
导师: 何建勇,王晓辉
关键词: 单克隆抗体,蛇毒纤溶酶原激活剂,杂交瘤,单抗特异性
文献来源: 沈阳药科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本课题以长白白眉蝮蛇蛇毒为原料，通过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析、Lysine Sepharose TM4B层析得到蛇毒纤溶酶原激活剂。以此为抗原对BALB／C小鼠进行免疫，通过杂交瘤技术获得免疫BALB／C小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞的阳性融合细胞株，使用定量的阳性融合细胞诱导小鼠产生效价高的腹水，将小鼠腹水用辛酸．硫酸铵法进行一系列的纯化。共获得4株长白白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶原激活剂单克隆抗体，为287、3C11、4E7、4H10。进行较系统的免疫特性的鉴定：4株单抗特异性高，与u-PA、BSA均无交叉反应；腹水效价8200～10000；免疫球蛋白亚类为IgG1和IgG2a；4株抗体中，287和3C11可明显抑制长白白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶原激活剂活性，而4E7、4H10则对其活性无明显影响。287和3C11这2株抗体为建立ELISA法检测长白白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶原激活剂含量以及研究其功能和结构的关系奠定了基础，并为该成分的亲和层析提供重要配体。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
缩略词表
绪论
一、单克隆抗体的应用现状
二、单克隆抗体的研究现状与进展
三、单抗与溶栓治疗
材料与方法
第一部分 实验材料
一、主要试剂
二、主要仪器设备
三、其它材料
第二部分 实验方法
一、长白白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶原激活剂的纯化
二、纯度鉴定
三、动物免疫
四、小鼠骨髓瘤细胞(SP2／0)的培养
五、制备饲养细胞板
六、免疫合格的Balb／c小鼠脾细胞与sp2／0细胞融合
七、培养与观察
八、单克隆抗体的检测—酶联免疫吸附试验(ELISA)
九、克隆化培养
十、单克隆抗体的多量制备
十一、单克隆抗体的鉴定
实验结果
第一部分 长白白眉蝮蛇蛇毒中纤溶酶原激活剂的纯化
一、DEAE-Sephadex A-50柱层析结果
二、Sephadex G-75柱层析结果
三、Lysine Sepharose TM 4B柱层析
第二部分 单克隆抗体的制备
一、动物免疫
二、小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠脾细胞的融合
三、克隆化培养
四、杂交瘤小鼠腹腔传代
五、单克隆抗体的特异性鉴定
讨论
一、免疫方案的建立
二、酶联免疫法的应用
三、小鼠腹水的制备
四、辛酸-硫酸铵法纯化单克隆抗体
五、单克隆抗体的特异性鉴定
结论
参考文献
致谢
发布时间: 2006-12-14
相关论文
- [1].短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂对动物凝血、循环、呼吸和中枢神经系统功能的影响[D]. 姚天赐.福建医科大学2010
- [2].重组织型纤溶酶原激活剂、尿激酶和降纤酶体外溶栓效果比较[D]. 宁玉梅.暨南大学2009
- [3].江浙短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的药代动力学过程[D]. 林丽丽.福建医科大学2009
- [4].白眉蝮蛇毒Gln49磷脂酶A2体外凝血活性[D]. 张秋艳.大连理工大学2007
- [5].白眉蝮蛇磷脂酶A2分离纯化及抗肿瘤活性研究[D]. 杨磊.昆明理工大学2008
- [6].长白白眉蝮蛇蛇毒中纤溶酶原激活剂的研究[D]. 王春盛.沈阳药科大学2004
- [7].蛇毒纤溶酶的纯化、性质鉴定、与水蛭素对血栓的协同作用研究[D]. 张箴波.广西医科大学2006
- [8].蛇毒纤溶酶Alfimeprase在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定[D]. 史婧.西北农林科技大学2007
- [9].白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶的分离纯化及酶学表征[D]. 武国栋.大连理工大学2006
- [10].白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2的神经毒性研究[D]. 常妍.大连理工大学2006
标签：单克隆抗体论文; 蛇毒纤溶酶原激活剂论文; 杂交瘤论文; 单抗特异性论文;