快速构建组织工程化骨的条件优选及eNOS对其作用机制的研究

快速构建组织工程化骨的条件优选及eNOS对其作用机制的研究

论文题目: 快速构建组织工程化骨的条件优选及eNOS对其作用机制的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 颌面外科学

作者: 何东宁

导师: 吕春堂,金岩,周中华,汪大林,曹志忠

关键词: 骨组织工程,快速构建,一氧化氮,骨缺损

文献来源: 第二军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:本实验旨在探讨体外不同条件下构建组织工程化骨的方法,对其在兔骨缺损修复中的效果进行评价,并对NO及eNOS的作用机制进行了研究。方法:体外即刻构建或经RCCS快速构建组织工程化骨修复兔骨缺损,观察骨组织修复重建的效果;检测不同条件下eNOS mRNA表达水平和NO生成含量及其对兔下颌骨标准性骨缺损修复的影响;检测eNOS基因修饰组织工程化骨裸鼠体内异位成骨能力。结果:兔骨缺损修复实验显示,细胞-支架复合体即刻种植新骨形成较差,联合应用引导组织再生膜可提高新骨形成面积百分比。RCCS培养的组织工程化骨,其颅骨修复效果优于静态培养,且24h培养和72h培养无显著性差异。RCCS增加细胞eNOS mRNA水平,培养液中NO含量增加。给予L-argine增加NO生成,兔下颌骨缺损区成骨量明显高于L-NAME组。真核表达载体pEGFP-N3-eNOS转染MSCs植入裸鼠皮下,毛细血管生长和新骨形成活跃。结论:细胞-支架复合体即刻回植体内时联合应用引导组织再生膜可有效防止细胞流失,促进成骨。RCCS是体外快速构建组织工程化骨的有效方法,只需培养24h便可获得良好的骨修复能力。RCCS可上调eNOS mRNA水平,增加NO产量。增加的NO能有效提高骨缺损修复效果。eNOS基因修饰的组织工程化骨有助于加速骨缺损的修复。

论文目录:

缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言

正文

第一部分 优化组织工程种子细胞培养及生物支架选择

实验一 兔自体骨髓基质干细胞的分离、扩增和生物学特性检测

实验二 优化骨髓基质干细胞成骨诱导条件的研究

实验三 BMP—胶原/陶瓷化骨支架制备及生物相容性检测

第二部分 不同培养环境和时间对组织工程化骨修复效果的影响

实验一 即刻构建组织工程化骨修复骨缺损的实验研究

实验二 利用RCCS体外快速构建组织工程化骨的实验研究

实验二 快速构建组织工程化骨修复骨缺损的实验研究

第三部分 一氧化氮在骨组织工程中的作用及应用

实验一 培养坏境和时间对组织工程化骨NOS表达的影响

实验二 一氧化氮对组织工程化骨修复兔下颌骨缺损的影响

实验三 eNOS基因修饰组织工程化骨的实验研究

全文总结

文献综述一

文献综述二

发表文章

致谢

发布时间: 2005-07-19

参考文献

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