成年恒河猴体内异位构建血管化组织工程骨的实验研究

论文题目: 成年恒河猴体内异位构建血管化组织工程骨的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 骨外科学

作者: 汪群力

导师: 裴国献

关键词: 组织工程,恒河猴,骨髓基质干细胞,血管束,血管化,绿色荧光蛋白,安全性

文献来源: 第一军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的 (1) 对猴骨髓基质干细胞(rBMSc)进行体外培养及扩增,观察其原代及传代细胞的生长特点及生物学特点。(2) 观察恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSc)与新型可吸收羟基磷灰石(HA)及AO人工骨β-磷酸三钙(β-TCP)的体外相容性。为在灵长类动物体内构建组织工程化骨作材料方面的准备。(3) 用血管束植入法异位构建血管化的组织工程骨,观察血管化的效果及对成骨作用的影响。(4) 用绿色荧光蛋白(GFP)标记rBMSc,观察其在组织工程骨体内构建中对种子细胞的示踪作用。(5) 对恒河猴体内构建组织工程骨进行安全性评价。方法 (1) 从髂后上棘抽取成年恒河猴骨髓,用全骨髓培养法进行体外培养获得BMSc,胰酶消化传代,用条件培养基培养传代细胞。逐日倒置显微镜观察细胞生长情况,对传代细胞进行HE染色及碱性磷酸酶(ALP)染色。(2) 取第三代恒河猴骨髓基质细胞与材料复合培养。实验分三组:A组将rBMSc与HA复合培养,B组rBMSc与β-TCP复合培养,C组为对照,只有细胞不加材料。倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞形态及增殖情况,MTT法半定量检测细胞增殖情况。(3) 将可降解HA订制成中空的圆柱体,侧方开槽。实验分4组,① 可吸收羟基磷灰石(HA)组(M组):单将材料植于肌袋内;② HA+rBMSc组(MC):将材料接种诱导培养的rBMSc;③ HA+血管束植入组(MB):将材料内植入血管束,不加细胞;④ HA+血管束植入+rBMSc(MBC):材料接种细胞并植入血管束。需种细胞的组别,将经诱导培养的rBMSc以5×10~6/ml的密度接种于材料上。血管束植入组,将胸背动静脉分离,将其游离约4～5cm,将血管束从材料的侧槽内

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

第一章恒河猴骨髓基质干细胞的体外培养

1．1 材料与方法

1．2 结果

1．3 讨论

1．4 参考文献

第二章恒河猴骨髓基质干细胞与新型可吸收羟基磷灰石及β-磷酸三钙体外相容性的观察

2．1 材料与方法

2．2 结果

2．3 讨论

2．4 参考文献

第三章血管束植入对恒河猴体内异位构建血管化组织工程骨的作用

3．1 材料与方法

3．2 结果

3．3 讨论

3．4 参考文献

第四章绿色荧光蛋白标记对组织工程骨体内成骨的示踪作用

4．1 材料与方法

4．2 结果

4．3 讨论

4．4 参考文献

第五章恒河猴体内构建组织工程骨的安全性评价

5．1 材料与方法

5．2 结果

5．3 讨论

5．4 参考文献

全文总结

文献综述

附录缩略词表

在读期间发表论文情况

致谢

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发布时间: 2006-01-06

参考文献

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成年恒河猴体内异位构建血管化组织工程骨的实验研究

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