小菜蛾神经细胞的形态描述及其轴突长度对杀虫剂的响应

论文摘要

昆虫神经细胞的突触传递和轴突位点是大多数杀虫剂的主要作用靶标。在细胞水平上,较少利用离体培养的小菜蛾神经细胞来研究神经毒性杀虫剂作用下靶标细胞的反应。本研究应用解剖镜研究了小菜蛾3龄幼虫中枢神经系统结构和分布,并描述小菜蛾3龄幼虫的脑神经细胞形态,以及评价毒死蜱、辛硫磷和银杏内酯B三种神经毒性杀虫剂对小菜蛾3龄幼虫脑神经细胞轴突长度的影响。利用体视显微镜观察到,小菜蛾幼虫的中枢神经系统包括一个位于头部的脑和一条位于消化道腹面的腹神经索。脑呈棕黄色,左右对称相通,无突出视叶,通过神经索与咽下神经节相连。腹神经索有胸神经节3对,腹神经节8对,前后的神经节由神经索相互连接。对小菜蛾3龄幼虫的脑神经细胞进行离体培养,获得四种形态的神经细胞：Ⅰ类,突起有一个；Ⅱ类,突起有两个,两个突起分支；Ⅲ类,突起有两个,其中一个突起不分支；Ⅳ类,突起有两个,两个都不分支。观察到小菜蛾神经细胞极性建立有三个阶段：1)细胞贴壁并且形成伪足；2)短突起的生长；3)其中的一个突起迅速延伸为轴突。毒死蜱、辛硫磷和银杏内酯B的浓度梯度都设置为10.00、1.00、0.10μg/mL。敏感品系小菜蛾神经细胞在含毒死蜱培养液中的轴突长度与抗毒死蜱品系相比差异不显著；辛硫磷对小菜蛾神经细胞轴突生长无抑制作用；银杏内酯B浓度大于1.00μg/mL时,对小菜蛾神经细胞轴突生长有抑制作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 小菜蛾抗药性
• 1.2 昆虫细胞培养
• 1.3 神经细胞
• 1.3.1 昆虫中枢神经系统
• 1.3.2 离体培养昆虫神经细胞的形态
• 1.3.3 神经细胞突起的生长
• 1.4 杀虫剂对神经细胞的影响
• 1.4.1 概述
• 1.4.2 神经细胞毒力测定的方法
• 1.4.3 毒死蜱、辛硫磷和银杏内酯B对神经细胞的影响
• 1.5 本研究的意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 试剂与主要仪器
• 2.2.1 主要药剂
• 2.2.2 常用试剂配制
• 2.3 小菜蛾中枢神经系统解剖
• 2.3.1 脑组织
• 2.3.2 腹神经索
• 2.3.3 神经节染色
• 2.4 小菜蛾神经细胞培养
• 2.4.1 机械方法解离的小菜蛾幼虫神经细胞
• 2.4.2 不同品系小菜蛾神经细胞的动态描述
• 2.5 杀虫剂对小菜蛾神经细胞的毒力
• 2.5.1 银杏内酯B对小菜蛾神经细胞的影响
• 2.5.2 辛硫磷对小菜蛾神经细胞的影响
• 2.5.3 毒死蜱对小菜蛾神经细胞的影响
• 2.6 数据分析方法
• 3 结果与分析
• 3.1 小菜蛾中枢神经系统
• 3.1.1 脑
• 3.1.2 腹神经索
• 3.1.3 神经节
• 3.2 机械方法解离的小菜蛾幼虫神经细胞
• 3.2.1 敏感品系小菜蛾神经细胞离体培养形态
• 3.2.2 抗毒死蜱品系小菜蛾神经细胞离体培养形态
• 3.2.3 不同品系小菜蛾神经细胞的动态描述
• 3.2.4 敏感品系与抗毒死蜱品系小菜蛾神经细胞直径对比
• 3.3 杀虫剂对小菜蛾神经细胞的毒力
• 3.3.1 银杏内酯B对小菜蛾神经细胞的影响
• 3.3.2 辛硫磷对小菜蛾神经细胞的影响
• 3.3.3 毒死蜱对小菜蛾神经细胞的影响
• 4 讨论
• 4.1 小菜蛾中枢神经系统
• 4.2 小菜蛾神经细胞离体培养形态
• 4.3 毒死蜱、辛硫磷和银杏内酯B的神经毒力
• 参考文献
• 附录
• 附录1 主要仪器及软件
• 附录2 主要耗材
• 附录3 神经细胞不同固定时间
• 附录4 小菜蛾幼虫神经节
• 致谢