蓝莓渣多酚分离纯化及抗氧化活性研究

论文摘要

本文研究了蓝莓渣多酚的提取工艺,确定了蓝莓渣多酚的最优提取工艺参数；研究了大孔吸附树脂对蓝莓渣多酚的最佳纯化条件,使蓝莓渣多酚的纯度大大提高；研究了聚酰胺层析柱对蓝莓渣多酚的初步分离,并利用HPLC-DAD-MS技术对蓝莓渣多酚的具体组成进行了分析；评价了蓝莓渣多酚粗提物和纯化物的体外抗氧化活性。主要结果如下：通过单因素试验研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度、振荡频率、pH、提取次数等因素对蓝莓渣多酚提取率的影响,使用Design Expert7.0软件设计,通过Plackett Burman试验及响应曲面试验分析确定了乙醇提取蓝莓渣多酚的最佳工艺条件为：乙醇浓度60%,液料比20（mL/g）,提取温度80℃,pH2。在此条件下,蓝莓渣多酚提取率为97.01%。对8种不同型号的大孔树脂进行筛选,AB-8树脂的吸附量为24.48mg/g,解析率为95.49%,并且达到吸附平衡与解析平衡的时间较短,较适合蓝莓渣多酚的纯化。最佳吸附条件为上样溶液多酚浓度2.6mg/mL、pH2、上样速率2mL/min;最佳洗脱条件为乙醇体积分数60%、洗脱速率2mL/min,洗脱体积80mL,在此条件下,蓝莓果渣多酚纯度由11.05%提高到59.29%。采用聚酰胺层析柱对蓝莓渣纯化多酚进行初步分离,结合蓝莓渣的HPLC-DAD-MS结果与相关文献报道,鉴定蓝莓果渣中含有16种多酚,分别为：飞燕草色素-3-半乳糖苷,B型原花青素二聚体,飞燕草色素3-葡萄糖苷,飞燕草色素3-阿拉伯糖苷,矢车菊色素3-半乳糖苷,牵牛花色素3-半乳糖苷,牵牛花色素3-葡萄糖苷,牵牛花色素3-阿拉伯糖苷,A型原花青素二聚体,锦葵色素3-半乳糖苷,锦葵色素3-葡萄糖苷,芦丁,槲皮素-葡萄糖醛酸,槲皮素和两种未知多酚。通过八种方法比较了蓝莓渣粗提多酚（BPEP）.蓝莓渣纯化多酚（BPPP）及芦丁的体外抗氧化活性。在ABTS+自由基清除能力、DPPH·自由基清除能力、亚硝酸盐清除能力、ORAC值方面,BPEP与BPPP均高于Rutin或者与其相当。而三种样品FRAP值和还原力顺序为BPPP>Rutin>BPEP,·OH自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力顺序为Rutin大于BPPP和BPEP。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 蓝莓及其资源分布
• 1.2 蓝莓的主要活性成分及其保健功能
• 1.2.1 蓝莓的营养成分
• 1.2.2 蓝莓的营养保健功能
• 1.3 蓝莓的开发利用
• 1.4 植物多酚的研究现状
• 1.4.1 植物多酚简介
• 1.4.2 植物多酚的提取方法
• 1.4.3 植物多酚的分离纯化方法
• 1.4.4 植物多酚的结构鉴定方法
• 1.5 论文的意义和主要内容
• 1.5.1 研究背景与意义
• 1.5.2 主要研究内容
• 第2章 响应面法优化蓝莓渣多酚的提取工艺
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 蓝莓渣多酚的测定方法
• 2.2.2 有机溶剂提取蓝莓渣多酚的工艺流程
• 2.2.3 蓝莓渣多酚提取的单因素试验
• 2.2.4 PlackettBurman试验
• 2.2.5 响应曲面试验
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 单因素实验结果
• 2.3.2 蓝莓渣多酚提取显著性影响因素的确定
• 2.3.3 蓝莓渣多酚提取工艺参数的优化
• 2.4 结论
• 第3章 大孔树脂纯化蓝莓渣多酚的工艺优化
• 3.1 材料与仪器
• 3.1.1 材料与试剂
• 3.1.2 仪器与设备
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 蓝莓果渣多酚提取液的制备
• 3.2.2 多酚浓度与纯度的测定
• 3.2.3 大孔树脂的预处理
• 3.2.4 大孔树脂的筛选
• 3.2.5 大孔树脂静态吸附及解吸附动力学曲线的绘制
• 3.2.6 大孔树脂纯化蓝莓渣多酚的条件优化
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 不同树脂对蓝莓果渣多酚的吸附及解吸特性
• 3.3.2 AB-8树脂吸附及解吸附蓝莓渣多酚的动力学特性
• 3.3.3 大孔树脂纯化蓝莓渣多酚的条件优化
• 3.3.4 蓝莓渣多酚纯度的计算
• 3.4 结论
• 第4章 蓝莓渣多酚的分离及组成分析
• 4.1 材料与仪器
• 4.1.1 材料与试剂
• 4.1.2 仪器与设备
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 蓝莓渣纯化多酚的制备
• 4.2.2 聚酰胺树脂的预处理
• 4.2.3 动态吸附与梯度洗脱
• 4.2.4 HPLC-DAD-MS试验方法
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 不同组分中的多酚组成
• 4.3.2 蓝莓渣多酚的组成
• 4.4 结论
• 第5章 蓝莓渣多酚的抗氧化活性研究
• 5.1 材料与仪器
• 5.1.1 材料与试剂
• 5.1.2 仪器与设备
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 蓝莓果渣多酚的制备
• 5.2.2 抗氧化能力测定方法
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 总抗氧化能力的测定
• 5.3.2 清除DPPH·自由基能力的测定
• 5.3.3 清除羟自由基（·OH）能力的测定
• 5.3.4 还原力的测定
• 5.3.5 清除亚硝酸盐能力的测定
• 5.3.6 FRAP值的测定
• 5.3.7 清除超氧阴离子自由基能力的测定
• 5.3.8 氧化自由基清除能力（ORAC）
• 5.4 结论
• 主要结论
• 参考文献
• 在读期间发表的学位论文及研究成果
• 致谢