论文题目: 人spindlin1基因的功能研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 病理学与病理生理学
作者: 高艳红
导师: 裴雪涛
关键词: 亚细胞定位,成瘤性,信号传导
文献来源: 中国人民解放军军事医学科学院
发表年度: 2005
论文摘要: 卵巢癌是目前严重威胁妇女健康的恶性肿瘤,由于缺少早期临床诊断症状,60-70%的卵巢癌处于晚期诊断,手术难以根治,而目前治疗卵巢癌的药物特异性和敏感性均较差,使得卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,5年生存率一直徘徊在40%左右。因此寻找在卵巢癌的发生中敏感和特异的基因改变将有可能为临床卵巢癌的诊治提供有意义的生物学指标,为抗癌药物的研究提供新靶点,具有重要的理论和实际意义。 我们研究小组采用改良的mRNA差异显示PCR技术对卵巢癌和正常卵巢组织之间的差异表达基因进行了一系列的筛选和鉴定,获得并克隆了一个新基因,由于它与鼠类spindlin基因高度同源,因此命名为人spindlin1基因(GenBank登录号为AF317228)。对其分析如下: 1 新基因cDNA长度为4375bp,基因在236-949bp含有完整开放读框,预测编码由237个氨基酸组成的蛋白质。在新基因cDNA开放读框的第一个ATG上游-126bp处有同框终止密码子TGA,在3’末端4350bp处为典型的加尾信号AATAAA,此后18bp处为polyA尾。新基因cDNA全长序列与鼠的spindlin基因核酸序列具有96%同源性。基因在236-949bp含有完整开放读框,编码237个氨基酸,所编码氨基酸与鼠spindlin基因所编码的241个氨基酸具有98%的同源性。且新基因与鼠spindlin1基因一样、均在3’端具有长的非编码调控序列。即新基因cDNA在核酸序列、编码氨基酸序列和基因结构三方面与鼠的spindlin基因高度同源。Spindin1基因内含子和外显子剪切位点分析表明,所得基因序列与人第9号染色体RP11-317b17克隆序列中的5个部分顺序一致,可以推断基因来源于人第9号染色体。cDNA由5个外显子组成,基因组DNA由五个外显子和4个内含子组成,基因组全长为52.3kb。进一步分析基因组中内含子和外显子的结构特征,表明内含子和外显子之间的剪切完全符合GT-AT法则。 2 spindlin1基因编码蛋白为一亲水性膜内蛋白,分子量约为27Kd,等电点为5.615。它含有三个重复的spin-ssty结构域,属于spin/ssty家族。生物信息学预测其具有MAPK磷酸化位点、酪氨酸蛋白激酶磷酸化位点、RNA结合蛋白作用位点、cAMP依赖性酪氨酸蛋白激酶磷酸化位点、PKC磷酸化位点等。 3 spindlin 1基因的染色体定位分析表明其定位在第9号染色体的长臂9q22.1-22.3
论文目录:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
主要仪器
主要试剂
第一部分 spindlin1基因的生物信息学分析
cDNA的结构分析
蛋白序列分析
蛋白质的基本性质
蛋白质序列的结构功能域分析
蛋白质序列的同源性分析
spindlin1的表达谱分析
材料与方法
实验结果
讨论
第二部分 Spindlin1的亚细胞定位
第一节 pEGFP-N1-spindlin1融合表达载体的构建
材料与方法
实验结果
第二节 Spindlin1的亚细胞定位
材料与方法
实验结果
讨论
第三部分 Spindlin1对NIH3T3细胞的致瘤作用
材料与方法
实验结果
讨论
第四部分 Spindlin1对NIH3T3细胞的致瘤机理探讨
第一节 spindlin1重组腺病毒载体的构建与感染
材料与方法
实验结果
第二节 spindlin1引起细胞致瘤过程中相关的信号转导分子机制
材料与方法
实验结果
讨论
小结
文献综述
致谢
博士期间已发表的论文及参与编写的专著
spindiinl编码的蛋白质定位于细胞核并使NIH3 T3细胞发生恶性转化
发布时间: 2005-09-05
参考文献
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