氯胺酮对鼠脊髓背角星形胶质细胞的保护作用

氯胺酮对鼠脊髓背角星形胶质细胞的保护作用

论文摘要

目的 观察氯胺酮对N-甲基-D-天(门)冬氨酸(NMDA)受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡及胞内游离钙浓度([ca2+]i)、Bcl-2和Bax、IL-1β和TNFα及IL-10、MDA和SOD变化的影响,探讨其对NMDA诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的保护机制。 方法 取新生2~3天wistar大鼠T11-L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养,Glial fibrilary acidic protein(GFAP)鉴定星形胶质细胞纯度达98%后用于实验。将细胞随机分6组:对照组(C组),NMDA组(N组),氯胺酮组(K组),余下3组为NMDA+不同终浓度氯胺酮组(10,50,100μmol/L,标记为NK1-NK3组),继续培养24小时或30分钟后取各组细胞检测SOD活性和MDA含量,取各组培养孔上清液检测IL-1β、TNFα和IL-10含量,免疫组化观察Bcl-2/Bax表达和细胞形态学变化,流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率和[ca2+]i。 结果 N组细胞发生了大量凋亡或死亡,其上清液中IL-1β和TNFα含量明显上升,IL-10无明显变化,Bax表达显著增强,Bcl-2无明显表达,SOD活性显著降低,MDA含量明显增加,[ca2+]i显著升高;NK3组细胞凋亡被显著抑制,Bcl-2强阳性表达,Bax表达不明显,[ca2+]i显著降低,IL-1β和TNF-α含量低,而IL-10含量明显上调,SOD活性明显增加和MDA含量低。 结论 NMDA激活脊髓背角星形胶质细胞,引起胞内Ca2+超载,使之分泌IL-1β和TNFα,并产生大量氧自由基,引起脂质过氧化作用,产生大量脂质过氧化物,降低抗氧化酶活性,导致细胞损伤,诱发促凋亡基因蛋白Bax过度表达而诱导细胞大量凋亡。适量氯胺酮能抑制激活的背角星形胶质细胞内Ca2+超载,抑制其分泌IL-1β和TNFα,增强了抗炎性细胞因子IL-10的合成与释放,并增强了抗氧化酶活性,抑制了脂质过氧化反应引起的细胞损伤,诱发抗凋亡基因蛋白Bcl-2过度表达而抑制了星形胶质细胞凋亡。

论文目录

  • 一、中文摘要
  • 二、英文摘要
  • 三、引言
  • 四、正文
  • 1、材料和方法
  • 2、结果
  • 3、讨论
  • 4、结论
  • 5、附图
  • 6、参考文献
  • 五、综述
  • 1、正文
  • 2、参考文献
  • 相关论文文献

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