论文摘要
免疫抑制剂环孢素A（cyclosporine A,CsA）是一种由11个氨基酸组成的环状多肽,广泛用于肝、肾、肺、骨髓、胰等器官或组织移植术后病人,以预防和治疗排异反应[1]。CsA的分子量大、亲脂性强、水溶性低、口服生物利用度较低[2,3]。本研究采用固体分散技术改善难溶性药物环孢素A（CsA）的溶解性能,提高其生物利用度,并制成可上市的速释剂型——固体分散片,以增加药物的溶出速率及经胃肠道的吸收速度,提高生物利用度。本试验制备出CsA-F68（1:3）固体分散体及CsA-F68-PEG（1:2:1）、CsA-F68-PVP（1:2:1）、CsA-F68-PVP-PEG（1:1:1:1）三种联合载体的固体分散体,能显著增加CsA的溶出。X-射线衍射表明环孢素A在固体分散体中以无定形状态分散,其增溶机制可能与晶格点阵面间距、晶粒大小及晶格取向等参数的改变密切相关;傅立叶红外扫描图谱证实在固体分散体的形成的过程中载体与环孢素A无相互作用;扫描电镜进一步直观的验证了固体分散体形成了不同于原料药和物理混合物的新形态。同时考察了四种固体分散体的稳定性,发现CsA-F68-PVP（1:2:1）固体分散体6个月后溶出百分率从98.12%降至86.16%;CsA-F68-PVP-PEG（1:1:1:1）固体分散体6个月后溶出百分率从87.27%降低76.57%;而CsA-F68（1:3）固体分散体、CsA-F68-PEG（1:2:1）固体分散体稳定性良好,放置6个月仍然能完全溶出。X-射线衍射试验可以解释后两种处方溶出度降低的原因。而红外谱图不能反映固体分散体的稳定性变化。在稳定性较好的两个处方中,CsA-F68-PEG（1:2:1）固体分散体在降低粘度利于成型、提高回收率方面与CsA-F68（1:3）固体分散体相比有明显的优势,所以选定CsA-F68-PEG（1:2:1）固体分散体作为分散片的主药进行下步实验。我们以分散片的崩解时限、环孢素A的溶出百分率以及压片物料的流动性为主要的考察目标,进行分散片的处方筛选。先进行单因素考察,筛选了崩解剂、填充剂、润滑剂的种类以及它们的用量。进一步采用四因素三水平正交试验设计对填充剂、崩解剂、润滑剂的用量进行了优化,得出环孢素A固体分散片的最终处方:环孢素A固体分散体25%、MCC66%、PVPP8%,微粉硅胶0.5%、硬脂酸镁0.5%（400mg/片）。确定处方之后考察制备工艺和流程并试制三批样品供质量标准研究、质量检查和稳定性试验用。还测定出压片物料的临界相对湿度为76.43%,说明压片时应控制环境相对湿度在76.43%以下。测定自制环孢素A固体分散片与新山地明溶出曲线,发现自制环孢素A固体分散片溶出较快,10分钟内已溶出100%;而市售制剂CsA微乳软胶囊（生产日期为200507的新山地明及生产日期为200610的新山地明）溶出稍慢,到60分钟仍未达到100%。生产日期为200507的新山地明与生产日期200610的新山地明相比,胶囊破壳迟,溶出慢,且SD值较大,推测可能是处方中的稀乙醇成分在储存一段时间之后,使胶囊变性软化,稳定性下降,从而导致溶出下降。环孢素A固体分散片的质量评价中,建立了反相高效液相色谱法测定环孢素A含量的方法。稳定性影响因素试验表明制剂在40℃高温的条件下较稳定,但在光照条件下,环孢素A含量明显降低;在75%高湿条件下,第10天含量和溶出度下降。表明光照和湿度对制剂的质量有影响,提示本品应避光密封保存。本文还以市售环孢素A微乳剂新山地明为参比制剂,采用双交叉自身对照实验设计,考察了环孢素A固体分散片在Beagle犬体内的初步药动学和生物利用度。建立了高效液相色谱法测定全血样品中环孢素A浓度的方法。通过方法学考察,表明该方法能满足环孢素A体内药动学研究的要求。Beagle犬的体内药动学实验结果表明,单剂量口服环孢素A固体分散片后,体内药动学基本符合二室模型。环孢素A固体分散片与新山地明的AUC0→∞分别为（4074.973±574.376）ng·h/mL、（4463.306±861.289）ng·h/mL,峰浓度Cmax分别为（780.975±49.527）ng/ml、（1066.28±80.906）ng/ml,达峰时间Tmax分别（2.25±0.5）h、（1.75±0.289）h,环孢素A固体分散片的相对生物利用度为91.30%。本实验制成的环孢素A固体分散片能显著提高CsA的体外溶出速率,与参比制剂新山地明软胶囊没有显著性差异;而在以Beagle犬为模型的药动学试验中,环孢素A固体分散片的相对生物利用度为91.30%。与新山地明相比,比试验制备的环孢素A固体分散片大大降低了生产成本,制备工艺稳定,为临床提供新型的环孢素A的制剂打下基础。