论文摘要
目的:通过研究雌激素对体外培养的人皮肤成纤维细胞MMP-1的mRNA转录水平的影响,探讨雌激素减缓皮肤老化的机制。方法:首先采用酶消化法进行体外人皮肤成纤维细胞原代培养,然后将不同浓度的雌激素(0mol/L,1×10-5mol/L,1×10-4mol/L)加入体外培养的人皮肤成纤维细胞中,待药物作用后,提取其中的总RNA,通过逆转录反应获得cDNA,并进行体外扩增,对扩增产物进行琼脂凝胶电泳,并根据条带的亮度来判断成纤维细胞中MMP-1 mRNA的表达水平。结果:经酶消化法体外培养的皮肤成纤维细胞,增生活跃,形态良好,呈典型的梭形、柳叶形,用细胞计数法进行生长曲线,显示:潜伏期为0~2天,指数生长期为2~5天,之后进入平台期。对细胞进行雌二醇干预,经β-actin内参校正后,RT-PCR示低剂量组与对照组相比,MMP-1 mRNA表达水平的差异没有统计学意义,高剂量组雌激素与对照组相比,MMP-1 mRNA表达水平有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雌激素可以下调MMP-1基因的转录水平,减少后者对胶原的降解,增加真皮的厚度及弹性,逆转或延缓皮肤老化。
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