肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化逆转的关系及机制探讨

论文摘要

目的:动态观察实验性肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡情况,采用 HGF 作为治疗手段观察肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化的逆转的关系。探讨肝纤维化的凋亡机制及 HGF 抗肝纤维化凋亡机制。 方法: 48 只雄性 Wistar 大鼠,体重 200±20g,随机分为正常组（n=16）、模型组（n=16）和 HGF 治疗组（n=16）。正常组正常饮水饮食,皮下注射 100%色拉油,每周 2 次,共 8 周。模型组和 HGF 治疗组以 5%乙醇为唯一饮料,皮下注射 40%四氯化碳色拉油溶液,每周两次,共 8 周。HGF 治疗组于造模 2 周后给予 HGF 腹腔注射,每天一次。造模2 周后分别随机取各组大鼠 2 只处死,进行 HE 染色。造模 5 周末、8周末随机处死各组大鼠 7 只。进行 HE 染色及胶原纤维染色,进行肝功能和血清肝纤维化指标检测。PCNA 和 TUNEL 标记法分别检测肝细胞增殖和凋亡百分率。采用免疫组化方法检测α-SMA、Bcl-2、Bax、Cyt C、 Caspase-3 的表达。 结果: 1.病理形态学分析:模型组造模 5 周后可见肝小叶结构紊乱,汇管区扩大,纤维组织明显增生,并向肝小叶内延伸分割肝小叶,造模 8周后有明显完整的纤维间隔包绕肝结节形成假小叶。HGF 治疗组治疗 6周后治疗组与模型组比较肝细胞变性坏死、炎性细胞浸润及纤维组织重庆医科大学研究生学位论文 3增生较轻（P<0.01）。VG 染色显示治疗 6 周后 HGF 治疗组与模型组比较中央静脉周围及汇管区纤维组织增生较轻或有纤细的纤维间隔形成（P<0.05）。2.肝功能和血清肝纤维化指标结果:模型组和 HGF 治疗组均较正常组增高（P<0.01）,治疗 6 周后 HGF 治疗组较模型组明显降低（P<0.05）。3.肝细胞增殖率测定（PCNA）: 本实验发现模型组、HGF 治疗组大鼠肝细胞增殖明显多于正常组（P<0.01）,模型组 5 周与 8 周相比有明显差异（P<0.05）,HGF 治疗组与模型组比较治疗 6 周后 PCNA 阳性表达明显增高（P<0.05）。4.肝细胞凋亡率测定（TUNEL 法）:本实验发现模型组、HGF 治疗组大鼠肝细胞凋亡明显多于正常组（P<0.01）,HGF 治疗组与模型组比较在治疗 6 周后 HGF 治疗组肝细胞凋亡明显减少（P<0.05）。5. α-SMA 免疫组化结果:本实验发现模型组、HGF 治疗组大鼠α-SMA 表达明显多于正常组（P<0.01）,HGF 治疗组治疗 6 周后与模型组比较α-SMA 的表达明显减少（P<0.05）。6.凋亡调控蛋白的检测结果: Bcl-2 表达在治疗 6 周后 HGF 治疗组较模型组增多（P<0.01）,Bax、Cyt C、Caspase-3 表达在治疗 6 周后 HGF 治疗组表达较模型组减少（P<0.05）。结论: 1.肝纤维化时肝细胞凋亡较正常对照组增加,提示肝细胞凋亡是肝细胞增生不良、肝纤维化进展的重要促动因素。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化逆转的关系及机制探讨
• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 图片
• 文献综述：RNA 干扰在肝病研究中的进展
• 致谢
• 攻读硕士学位期间完成的论文