异丙酚对急性肺损伤细胞模型的NF-KB活性的影响

论文摘要

急性肺损伤（ALI）是由严重感染创伤和休克等多种致病因素导致的以血管通透性增加为主要临床表现的肺的炎性综合症。在炎症反应早期,创伤、休克以及革兰氏阴性细菌内毒素（LPS）能激活肺泡巨噬细胞（PAM）释放以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）为主的大量前炎性细胞因子,引发机体失控性炎症反应,导致ALI/ARDS 的发生。核因子-κB （NF-κB）是细胞中一个重要的转录因子,在细胞因子诱导的基因表达中起重要的调控作用。内毒素、休克等细胞外刺激通过信号转导通路,引起NF-κB 核易位,启动和调节多种炎症介质（TNF-α、IL-8 等）的基因转录,加重了ALI 的发病。研究发现异丙酚有一定的抗炎症作用,能够减轻内毒素对机体产生的损伤,但是否可以影响NF-κB 的激活通道而发挥其抗炎作用的文献尚未见报道。本实验通过体外LPS 刺激小鼠肺PAM 在细胞水平模拟急性肺损伤,观察异丙酚对LPS 刺激小鼠PAM 中NF-κB 活化的影响,从而进一步探讨异丙酚对NF-κB 激活通道的影响及其在ALI 中可能的抗炎作用。实验方法: 将培养好的小鼠肺泡巨噬细胞接种在底部放有玻片的12孔培养板中,使小鼠巨噬细胞均匀地贴壁生长。实验分为LPS 刺激组（加LPS10μg/ml）、异丙酚干预组（1同时加入LPS10μg/ml和异丙酚1μg/ml）、异丙酚干预组2（同时加入LPS10μg/ml 和异丙酚4μg/ml）异丙酚干预组3（同时加入LPS10μg/ml 和异丙酚16μg/ml）四组。各组PAM 在刺激0.5、1、2 和4h 分别用丙酮固定。用免疫组化的研究方法观察各组PAM 中NF-κB的激活情况,并用图像分析的方法对结果进行研究。同时用ELISA 法检测培养上清中的TNF-α浓度。实验结果: LPS 刺激组NF-κB 活性在给予刺激后0.5h 出现明显的增高,并在刺激后1h 达到峰值,培养上清中TNF-α含量也明显有增高。异丙酚干预组NF-κB 活性和培养上清中的TNF-α含量虽然也有不同程度的增高,但均显著低于LPS 刺激组（P 均<0.05）,并且呈剂量依赖性。结论: 肺巨噬细胞在接受LPS 刺激后,引起NF-κB 活性的增加,并引起TNF-α的释放。其中NF-κB 的迅速活化可能是肺泡巨噬细胞释放

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 主要英文缩略语表
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 个人简历
• 致谢