大鼠肝脏缺血再灌注损伤后水通道蛋白4表达变化

论文摘要

目的:肝脏缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,IRI）后常发生多种胆道并发症,可能与肝脏缺血再灌注损伤后胆管内皮细胞损伤导致胆汁的分泌变化有关,但其分子机制目前尚不清楚。水通道蛋白（aquaporin, AQP）是属于细胞膜结构蛋白中的一个家族,可以提供液体快速跨生物膜转运的通路。本研究通过建立大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型观察AQP4在肝内胆管细胞的表达变化,并同时检测肝脏功能变化,探讨肝脏IRI与水通道蛋白4表达变化的关系。方法:建立大鼠肝脏30分钟IRI模型。随机将配对动物分为对照和缺血再灌注2小时、1、3、7天组（每组6只）,并于上述不同时间点处死大鼠,留取大鼠血清标本行间接胆红素（IB）、直接胆红素（DB）及谷丙转氨酶（GPT）等肝功能指标检测;留取肝脏标本用于HE染色光镜下观察肝脏病理形态学变化、免疫组化染色观察AQP4表达变化,应用RT-PCR方法测定AQP4 mRNA的表达变化。结果:（1）肝功变化:缺血再灌注损伤2小时、1天、3天组IB、DB及GPT明显升高,与对照组间有显著差异（P<0.05）,并于术后第1天达到最高（P<0.05）;以后逐渐降低,术后第7天恢复正常。（2）肝脏病理学变化:术后HE染色可见缺血再灌注可造成大鼠肝组织变性、坏死。（3）免疫组织化学检测肝脏AQP4的变化:缺血再灌注损伤2小时、1天、3天组AQP4的表达量较对照组降低（P<0.05）,于术后第1天最低（P<0.05）,以后逐渐增高,于术后第7天恢复正常。（4）肝脏AQP4 mRNA表达变化:缺血再灌注损伤组2小时、1天、3天组AQP4 mRNA表达水平较对照组明显降低（P<0.05）,于术后第1天最低,以后又逐渐升高,于术后第7天恢复正常。结论:大鼠肝脏缺血再灌注损伤后可明显引起肝内胆管上皮细胞AQP4的表达降低,术后第1日最明显,至术后7日逐渐恢复正常,此种损害与包括胆红素在内的肝功能损害相对应,导致细胞的水通透障碍。其机制可能是AQP4表达降低导致造成细胞水肿,胆红素排出障碍及血胆红素升高,提示AQP4在肝脏缺血再灌注损伤过程中扮演着非常重要的作用,同时也提示AQP4可能是反映肝功能损害的重要指标。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢