C57BL/6j小鼠帕金森模型血浆生物学标记物研究

论文摘要

目的：1、观察年龄、造模药物剂量和给药时间对帕金森氏病（Parkinson’s disease, PD）模型的影响,,最终找出各因素最佳组合,从而建立帕金森氏病最佳模型,探讨年龄、神经毒素、辅助药物和有害因素刺激持续时间跟PD病理改变关系。2、利用ROC曲线（受试者工作曲线）分析小鼠血浆生化指标,寻找受其他因素影响小,在体内含量稳定,易于检测,且符合帕金森氏病（PD）病理改变,具有较高诊断效度的生物标记物。方法：1、利于正交设计表L9（34）安排小鼠年龄、神经毒素（MPTP1-methy1-4-phenyl-1,2,3,6-tet-1-甲基-4-苯基tetrahydropyridine1,2,3,6-四氢吡啶,MPTP）、辅助药物（丙磺舒）和给药时间四个因素三水平组合实验。通过酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase, TH）免疫组织化学方法观察小鼠巴胺神经元,根据酪氨酸羟化酶阳性细胞计（Count of positive cell, CPC）判断多巴胺神经元丢失情况。通过小鼠游泳试验和平均周耗饲料分别做为短时间和长时间行为学检测指标。2、采用正交设计表L9（34）安排小鼠年龄、神经毒素（MPTP）、辅助药物（丙磺舒）和给药时间四个因素三水平组合实验,用高效液相色谱法、比色法、ELISA法检测血浆生化指标,酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色,TH阳性细胞计数多巴胺神经元为金标准绘制ROC曲线。结果：1、直观分析显示对PD造模效果给药时间>MPTP>小鼠年龄>丙磺舒,优选最佳组合为年龄6个月、MPTP20mg/kg、丙磺舒200mg/kg、给药时间5周。通过方差分析发现仅给药时间因素有统计学意义（P>0.05）。行为学检测小鼠游泳时间和周均耗饲料与TH CPC成正相关,相关系数分别为0.388、0.450,且有统计学意义,P值分别为0.005、0.0012。2、DA、Ach、8-OHdG、UA、EGF和TH计数间的相关系数分别为0.07、0.05、-0.67、0.23、0.68,P值分别为0.000、0.110、0.7150、000、0.654,仅8-OHdG与EGF组有统计学意义,各指标曲线下面积（AUC）分别为0.53、0.53、0.82、0.55、0.82。结论：1、给药时间是PD造模最大影响因素,推测有害因素持续时间可能是PD发病的主要因素,造模时可适当减少药物用量延长造模时间来获得更好造模效果。2、8-OhdG与EGF与TH CPC相关性高,且其AUC在0.7～0.9之间,在小鼠模型中诊断PD具有一定准确性。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 英汉缩略词对照表
• 前言
• 第一部分 均匀正交设计优选小鼠帕金森氏病最佳模型研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 第二部分 ROC曲线分析小鼠帕金森氏病模型血浆生化指标
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文目录
• 致谢