曲安奈德对缺氧损伤人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的影响

论文摘要

目的：研究缺氧损伤的人视网膜色素上皮（human retinal pigment epithelium。hRPE）细胞表达血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的变化情况及曲安奈德（triamcinolone acetonide，TA）对其表达的影响。方法：体外培养人视网膜色素上皮细胞株，建立hRPE细胞氯化钴化学缺氧模型。实验分为正常对照组、缺氧损伤组、TA处理组，其中TA处理组根据曲安奈德浓度不同（①0．05mg／ml，②0．1mg／ml，③0．2mg／m1）分为三个亚组。采用比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率，采用免疫细胞化学方法、逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达变化。结果：1、hRPE细胞（hRPE-D407细胞株）以长梭形或多边形为主，单层贴壁生长，胞核透亮，胞浆丰富，细胞边界清楚。2、细胞免疫化学技术结果显示VEGF在正常的人视网膜色素上皮细胞中有少量表达，缺氧损伤后其表达水平升高，与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0．05）。3、TA处理组的三个亚组LDH释放率分别59．49+7．87，49．45±6．83，40．34±3．92，VEGF蛋白灰度值分别为134．34±4．42，137．77±6．43，142．97±6．31，VEGFmRNA相对表达量分别为0．74±0．04，0．68±0．04，0．52±0．05，与缺氧损伤组LDH释放率（69．2±5．18）、VEGF蛋白灰度值（131．62±3．05）、VEGFmRNA相对表达量（0．85±0．04）比较差异均具有统计学意义（P<0．05）。结论：VEGF在缺氧损伤的人视网膜色素上皮细胞中表达增强；曲安奈德可以抑制VEGF的表达和降低LDH的释放率，对hRPE细胞的缺氧损伤发挥一定保护作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 细胞培养
• 1.3 实验模型建立及分组
• 1.4 观察方法
• 1.5 统计学分析
• 第二章 结果
• 2.1 倒置相差显微镜下观察结果
• 2.2 细胞免疫化学染色
• 2.3 细胞总RNA提取鉴定
• 2.4 VEGF蛋白染色灰度值、LDH释放率及VEGF/GAPDH电泳灰度值比值
• 第三章 讨论
• 3.1 RPE细胞与年龄相关性黄斑变性
• 3.2 VEGF与脉络膜新生血管
• 3.3 曲安奈德与脉络膜新生血管及其作用机制
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢