日粮蛋白质水平对仔猪脂肪酸合成关键酶及其代谢产物的影响

论文摘要

本试验通过研究饲粮蛋白水平对断奶仔猪生产性能、血清脂质含量、脂肪酸合成关键酶含量、基因表达及其代谢产物的影响,旨在从代谢水平上证明蛋白质水平对脂肪酸合成的调控作用。试验采用单因素试验设计,选取24±1日龄断奶的DLY仔猪24头,按照体重一致,公母各半的原则随机分配到3个处理组中,每个处理4个重复,每个重复两头猪。各处理日粮能量一致,蛋白水平分别为23%（高蛋白）、20%（中蛋白）和17%（低蛋白）。试验日粮主要参照NRC（1998）5-10kg仔猪营养需要进行配制,试验期28天。试验结果表明:（1）高蛋白日粮显著提高仔猪生产性能,中低蛋白日粮则无明显差异。（2）高蛋白日粮趋向于降低仔猪血清甘油三酯,总胆固醇,极低密度脂蛋白-胆固醇水平,中低蛋白日粮对血脂水平的影响差异不显著。（3）高蛋白日粮极显著降低仔猪肝脏中FAS的活力（p＜0.01）,极显著降低肝脏和脂肪组织中ACC蛋白水平及其mRNA的相对表达量（p＜0.01）。（4）高蛋白日粮有降低肝脏丙二酰辅酶A趋势,与FAS相比ACC对脂肪酸合成的限速能力较弱。本实验结果证明,高蛋白日粮对脂质代谢的调控作用,主要是通过抑制ACC的基因表达和降低FAS的酶活,降低脂肪酸合成,减少体脂沉积,提高生产性能;与FAS相比ACC对脂肪酸合成的限速能力较弱。肝脏脂质代谢的丙二酰辅酶A途径对日粮蛋白水平引起的脂质代谢的影响较小,不具备调控脂质代谢的作用。

论文目录

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• 英文摘要
• 缩略语表
• 目录
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 1 日粮蛋白质对动物脂肪代谢的影响
• 1.1 蛋白质类型对动物脂肪代谢的影响
• 1.2 蛋白质水平对动物脂肪代谢的影响
• 2 乙酰辅酶A羧化酶与脂肪代谢调控
• 2.1 乙酰辅酶A羧化酶在脂肪代谢中的作用
• 2.2 乙酰辅酶A羧化酶的分类、定位与调控
• 2.3 乙酰辅酶A羧化酶研究的新进展
• 3 脂肪酸合成酶与脂肪酸合成的调控
• 3.1 FAS基因的结构特点
• 3.2 脂肪酸合成酶基因的调控位点
• 3.2.1 转录因子（transcription factor）
• 3.2.2 肝X受体（LXR）和固醇调控元件结合蛋白（SREBP）
• 3.2.3 激素应答元件
• 3.3 FAS对脂肪酸合成的调控作用
• 4 关键酶在代谢过程的效率分析
• 5 存在的问题
• 6 研究目的和意义
• 第二部分 试验研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验设计
• 1.2 试验动物及日粮
• 1.3 饲养管理
• 1.3.1 清洗消毒
• 1.3.2 试验动物的饲喂管理
• 1.3.3 取样
• 2 测定指标和测定方法
• 2.1 生产性能
• 2.2 血清代谢产物的测定
• 2.3 肝脏和背脂乙酰辅酶A羧化酶、丙二酸单酰辅酶A蛋白测定
• 2.3.1 样品的制备
• 2.3.2 酶蛋白的测定
• 2.4 肝脏和背脂FAS酶活的测定
• 2.4.1 所需试剂的配制
• 2.4.2 酶的提取
• 2.4.3 FAS酶活的测定
• 2.5 实时荧光定量PCR法测定乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达量
• 2.5.1 总RNA提取
• 2.5.2 琼脂糖凝胶电泳检测抽提的RNA的质量
• 2.5.3 吸光度检测RNA的质量
• 2.5.4 cDNA第一链的合成（RT）
• 2.5.5 RT产物的PCR
• 2.5.6 Real Time POR
• 2.5.7 ACC mRNA表达水平的计算
• 3 统计分析
• 4 结果
• 4.1 日粮蛋白水平对断奶仔猪生产性能的影响
• 4.2 日粮蛋白水平对ACC和M-CoA蛋白水平的影响
• 4.3 日粮蛋白水平对FAS酶活的影响
• 4.4 日粮蛋白水平对仔猪血液生化指标的影响
• 4.5 日粮蛋白水平对ACC mRNA表达的影响
• 4.5.1 总RNA提取结果
• 4.5.1.1 吸光度检测
• 4.5.1.2 凝胶电泳检测
• 4.5.2 荧光定量PCR扩增的标准曲线
• 4.5.3 日粮蛋白水平对ACC mRNA相对表达量的影响
• 5 讨论
• 5.1 日粮蛋白水平对断奶仔猪生产性能的影响
• 5.2 日粮蛋白水平对仔猪脂肪酸合成的影响
• 5.3 ACC和FAS在脂肪酸合成代谢过程中的效率分析
• 5.4 M-CoA对脂肪酸氧化代谢的影响
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附:硕士期间文章发表情况