论文摘要
背景和目的：急性白血病是常见的恶性血液系统疾病，由于白血病细胞的恶性增殖，白血病细胞浸润骨髓和髓外组织，使得骨髓正常造血活动受抑制且引起髓外脏器病变，从而导致白血病的发生；而白血病细胞髓外浸润是疾病的主要临床表现和预后不良的重要因素之一。关于白血病细胞髓外浸润的分子基础尚不十分清楚。目前的研究表明，β-连环蛋白（β-catenin）和基质金属蛋白酶（MMPs）通过改变白血病细胞的黏附特性而参与其中。β-catenin是一种多功能的蛋白质，在细胞间黏附和Wnt／β-catenin信号传导中起作用。在肿瘤细胞中，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡。在MMPs家族中，已经证明MMP-2和MMP-9参与白血病细胞的髓外浸润，而MMP-7是基质金属蛋白酶（MMPs）家族中重要成员之一，对细胞外基质成分有广泛的降解作用。在实体瘤中已经证实MMP-7与肿瘤浸润转移相关。MMP-7在血液系统恶性疾病中作用的研究仅见于白血病细胞株K562，其在急性白血病原代细胞的表达及其与髓外浸润的关系尚未见报道；国外对β-catenin在血液系统恶性疾病中作用的研究集中在白血病细胞株，国内对其在白血病原代细胞表达的研究报道较少；且二者在白血病中的相互关系及临床意义未见文献报道。本研究应用免疫组织化学染色方法检测了MMP-7、β-catenin在急性白血病骨髓单个核细胞的表达情况，分析二者与患者临床表现的相关性以及两者之间的相互关系，进而探讨MMP-7与β-catenin在急性白血病细胞的增殖和浸润中的可能作用。材料与方法：1．标本来源：所有骨髓标本均取自郑州大学第一附属医院血液科2006年5月-2006年11月门诊及住院患者，并经患者或家属同意。经细胞形态学、组织化学和细胞免疫学确诊的急性白血病患者51例：20例ALL患者，31例ANLL患者；骨髓涂片正常并排除其它恶性肿瘤的骨髓标本14例作为对照组（3例缺铁性贫血患者，2例巨幼细胞性贫血患者，3例特发性血小板减少性紫癜患者，1例急性肾衰患者，1例斯蒂尔病患者，4例发热患者）。2．实验方法：分离骨髓单个核细胞后制备细胞滴片用免疫组织化学染色方法检测MMP-7和β-catenin的表达。3．数据处理：结果运用SPSS10．0统计软件包处理，独立样本t检验；Fisher精确概率法；二元变量的相关分析（Pearson相关系数）；以α=0.05为显著性检验水准。结果：1．MMP-7在急性白血病患者骨髓单个核细胞高表达，阳性者呈棕黄色颗粒状定位于细胞质内；阳性率和积分分别为（45.22±18.79）％、71.16±36.76。对照组骨髓单个核细胞多为阴性表达，少数呈弱阳性表达；阳性率和积分分别为（9.54±5.34）％、12.74±7.01。白血病组显著高于对照组，差异有统计学意义（p＜0.05）。2．β-catenin在急性白血病患者骨髓单个核细胞中高表达，阳性者呈棕黄色颗粒定位于细胞质；阳性率和积分分别为（54.05±18.86）％、86.29±35.04。对照组骨髓单个核细胞大部分呈阴性表达，少数呈弱阳性表达；阳性率和积分分别为（18.11±9.29）％、18.62±9.53。白血病组显著高于对照组，两组的差异有统计学意义（p＜0.05）。3．急性白血病骨髓单个核细胞中MMP-7与β-catenin的阳性率呈正相关，相关系数r=0.58。4．髓外浸润组MMP-7及β-catenin阳性率分别为（63.83±9.16）％、（66.87±14.38）‰无髓外浸润组MMP-7及β-catenin阳性率分别为（31.30±7.29）％、（37.22±10.59）％；髓外浸润组MMP-7及β-catenin阳性率显著高于无髓外浸润组（p＜0.05）。结论：1．急性白血病骨髓单个核细胞MMP-7及β-catenin的表达均显著高于对照组。提示MMP-7和β-catenin在急性白血病细胞中表达异常。2．在急性白血病骨髓单个核细胞中MMP-7的阳性率与β-catenin阳性率之间呈正相关关系，提示Wnt／β-catenin信号传导途径在急性白血病细胞内异常激活。3．MMP-7和β-catenin在髓外浸润组骨髓单个核细胞中的表达水平均显著高于无髓外浸润组的表达水平，提示MMP-7和β-catenin可能与急性白血病细胞髓外浸润有关。