乳铁素的免疫调节作用机理的研究

论文摘要

牛乳铁素是牛乳铁蛋白在酸性环境下经胃蛋白酶作用N端释放的一段由25个氨基酸组成的多肽,具有抗菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞生长、调控基因表达、调节免疫等功能,其在食品、保健品、医药等行业具有广阔的应用和开发前景。本研究根据免疫调节功能性食品的评价指标对乳铁素的免疫调节作用进行了评价,并进行了分子水平的研究。在体外实验中,采用MTT法检测乳铁素对外周血单核细胞和脾淋巴细胞的免疫刺激作用,结果显示,95.6%纯度乳铁素和40.6%纯度粗分离乳铁素都具备促进T、B淋巴细胞增殖的作用,但是把95.6%纯度乳铁素配成不同浓度时,发现并不是浓度越高起刺激作用越大,而是在100μg/mL时达到最大值。通过体内实验,对脾脏、胸腺、细胞免疫,巨噬细胞吞噬功能以及体液免疫的调节作用进行了评价,结果表明,牛乳铁素对免疫低下小鼠脾脏、胸腺均具有保护作用,可明显提高免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能,可以明显增强免疫低下小鼠抗体分泌细胞分泌功能,提高血清溶血红素的含量,乳铁素具有显著增强细胞免疫、体液免疫的作用。通过分子水平的研究,对IL-2、IL-4、IL-6、IL-10以及TNF-α的调节作用进行了评价,结果显示,乳铁素对IL-2具有显著影响,而且是以40μg/mL乳铁素对IL-2影响最大。在小鼠免疫低下状态,灌胃三个小时时,乳铁素首先引起炎症因子TNF-α浓度的升高,而此时IL-10作为保护型抗炎因子浓度出现极大的提高从而抑制TNF-α带给机体的影响,而IL-10的极大浓度抑制了同属于Th2类细胞因子的IL-4、IL-6的分泌。研究表明乳铁素既可以在短期内对机体产生重要影响,也可以在长时期的使用过程中对机体产生重要影响,均可以起到免疫调节功能。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 课题的研究背景
• 1.2 乳铁素免疫调节的研究进展
• 1.3 免疫系统
• 1.4 开展此课题的依据
• 1.5 开展此课题的意义
• 第二章 材料和方法
• 2.1 牛乳铁素粗品的制备
• 2.2 牛乳铁素的分离与纯化
• 2.3 毛细管电泳
• 2.4 氨基酸组分分析
• 2.5 MTT法检测乳铁素对外周血单核细胞和脾淋巴细胞增殖的影响
• 2.6 功能学评价检验方法—增强免疫力功能检验方法
• 2.7 乳铁素对小鼠细胞因子的影响检测
• 第三章 实验结果
• 3.1 纯化乳铁素的制备及检验
• 3.2 乳铁素对外周血单核细胞和脾淋巴细胞增殖的影响的确定
• 3.3 增强免疫力功能检验结果
• 3.4 细胞因子检测实验结果
• 第四章 分析与讨论
• 4.1 乳铁素制备、纯化及分析讨论
• 4.2 体外实验初探分析与讨论
• 4.3 体内实验分析与讨论
• 4.4 乳铁素影响细胞因子变化结果分析与讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 论文、参加科研情况说明
• 致谢