论文摘要
骨炎宁颗粒是根据我院名老中医李同生教授祖传经验方，由金银花、赤芍、大血藤、天花粉、皂角刺，地榆等十味中药制备的纯中药复方制剂，具有解热止痛、活血消肿的功效。临床用于急慢性化脓性骨髓炎，关节炎，脓肿疔痛等。几十年来作为医院制剂在我院临床应用，由于具有明显疗效，深受病患者欢迎。本课题对骨炎宁颗粒的制备工艺、质量标准、主要药效学进行了研究，从而为该药开发成三类国家新药奠定了基础。采用正交试验法优选提取工艺，采用L9（34）正交试验表，选择可能影响提取效果煎煮次数（A）、加水量（B）、浸泡时间（C）、煎煮时间（D）4个因素进行试验，以绿原酸收率和出膏率为检测指标，综合得分=（绿原酸含量／最大值×0.5+出膏率／最大值×0.5）×100％，计算综合得分。从直观分析，各因素的影响作用主次：为A＞D＞C＞B；各因素不同水平的排序为：A2＞A3＞A1，B1＞B3＞B2，C2＞C3＞C1，D3＞D2＞D1。确定最佳水煎煮提取工艺为8倍水浸泡40min后，煎煮二次，每次60min，按照上述拟定工艺进行水煎提取试验，结果干膏得率13.60％，绿原酸的提取率为80.60％；用正交试验筛选喷雾干燥工艺条件，采用L9（34）正交试验表，选择可能影响干燥效果浸膏浓度（A）、进风温度（B）、出风温度（C）3个因素进行试验。以绿原酸收率和含水率为检测指标，各因素对绿原酸含量影响大小顺序为A＞C＞B，但浸膏相对密度影响非常显著，出口温度影响显著，进风温度对喷雾干燥时的绿原酸含量无明显影响。水分各个因素的影响依次为A＞B＞C，浸膏相对密度、进风温度两因素影响非常显著，出口温度影响显著，考虑到喷雾粉的水分指标都在合格范围内，初步确定最佳工艺为A3B3C1，确定最佳喷雾干燥工艺为浸膏相对密度1.3、进风温度110℃、出口温度40℃。按照上述拟定工艺进行喷雾干燥试验，结果水分率4.5％，绿原酸的提取率为79.40％；放大验证结果表明，按优选的提取、干燥工艺制备的颗粒，其干膏收率、干浸膏中绿原酸的含量与正交试验的工艺验证结果基本一致，绿原酸的转移率也可以接受，说明本提取工艺基本可行；通过薄层色谱法对骨炎宁颗粒中的大血藤、天花粉、皂角刺和地榆进行了定性的分析研究，结果表明，供试品色谱中，在与对照品（或对照药材）色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照样品则无此斑点，定性鉴别专属性强；通过高效液相色谱法，建立了绿原酸的含量测定方法，HPLC法测定样品中绿原酸含量的色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.4％磷酸水溶液（9：91）为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸计算应不低于5000，结果表明：骨炎宁颗粒中绿原酸与其它组分良好分离，绿原酸浓度线性范围在0.0025～0.04μg，r=0.9999，样品加样回收率为99.60％（n=6），RSD=1.07％（n=6）；通过高效液相色谱法，建立了芍药苷的含量测定方法，HPLC法测定样品中芍药苷含量的色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈一水（13：87）为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷计算应不低于5000，结果表明骨炎宁颗粒中芍药苷与其它组分良好分离，芍药苷浓度线性范围在0.06～0.96μg，r=0.99996样品加样回收率为98.5％（n=6），RSD=1.61％（n=6）；结果表明，定量分析重现性良好，方法可靠性强；通过加速试验和正常室温条件放置考察骨炎宁颗粒的稳定性，各项指标均无明显变化，说明该制剂的稳定性好。初步药理学研究表明骨炎宁颗粒提高了红细胞识别、粘附、杀灭细菌的能力，加强吞噬细胞的活动，可明显促进成骨，加快坏死组织的吸收，促进肉芽组织的修复；骨炎宁颗粒对所试革兰氏阳性菌、阴性菌有抑菌作用，特别是对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单孢菌等的抑菌活力强，MIC值为0.004～0.008g／ml。