论文摘要
中药复方成分复杂,是目前研究中的难点和关键。中药复方提取物是一个非常复杂的混合物,常常含有从无机物到有机物,从强极性到弱极性,从小分子到生物大分子,从同分异构体到对映异构体,从常量到痕量的各种成分。色质联用技术对于中药复方这种复杂混合物的分析具有十分重要的意义,中药复方化学物质基础的研究也是目前中药现代化研究中的一个难点和重要研究内容。本课题根据中药复方研究的现状,特别是针对中药复方质量控制以及中药复方化学物质基础研究存在的问题,以小柴胡汤作为研究对象,进行了小柴胡汤多成分的研究以及治疗作用的物质基础研究,考察确立小柴胡汤的前处理条件和高效液相色谱法-飞行时间质谱检测器联用（HPLC/DAD/TOF/MS）的色谱条件,建立了小柴胡汤中黄酮、三萜和皂苷类成分的含量测定方法,采用两张色谱图表征其中不同的化学成分。采用紫外检测器测定药材中的黄酮类及三萜成分,TOF/MS检测测定其中末端吸收的皂苷类成分,首次实现HPLC/DAD/TOF/MS联用对复方小柴胡汤中三类具有不同理化性质的5个化学成分的含量测定,样品前处理方法简单可行。本课题针对小柴胡汤及其类似的方剂（小柴胡合柴朴汤、小柴胡加桔梗石膏汤）引起肝功能损害问题,将小柴胡汤、减方小柴胡汤、小柴胡汤单味药材TOF/MS总离子流图中测得的化学成分及其肝细胞活性进行研究,运用多元线性回归分析影响肝细胞存活率的因素。结果发现药材黄芩中m/z为549.1591,分子式为C26H28O13的化学物质对肝细胞存活有明显抑制作用,可以初步推测C26H28O13为小柴胡汤中毒性化学成分。本文研究为小柴胡汤体内代谢毒性成分的进一步分析奠定基础,为中药及复方肝毒性成分的筛选提供思路。本文对中药复方合煎之后产生的新化学成分进行了初步研究,HPLC-TOF/ MS联合GeneSpring MS软件可以很好的分析中药复方中化学物质基础差异。应用HPLC-TOF/MS采集小柴胡汤中化学成分的总离子流图,应用GeneSpring MS软件对小柴胡汤各组分单方和复方化学成分进行比较和评价,获得小柴胡汤复方配伍所产生的新化学成分,可以更好的追踪阐明复方作用的物质基础,发掘中医方剂配伍的科学内涵,探索复方制剂过程中化学成分的变化规律,优化处方,制定科学的制剂工艺,提高中药复方制剂质量。