西宁地区仔猪致病性大肠杆菌血清型、黏附素及耐药性研究

西宁地区仔猪致病性大肠杆菌血清型、黏附素及耐药性研究

论文摘要

对西宁地区规模化养猪场仔猪致病性大肠杆菌进行了分离及致病性、血清型鉴定,确立了流行优势血清型;对主要流行菌株进行了黏附素性菌毛的检测及菌毛抗原免疫试验;用14种抗生素对170株流行菌株用NCCLS方法进行了耐药性检测。从西宁地区8个规模化养猪场的247份腹泻仔猪直肠棉拭子样本及39份疑似仔猪水肿病死亡病料中分离、鉴定出253株致病性大肠杆菌,总检出率88.5%(253/286),其中从腹泻仔猪检出致病性大肠杆菌233株,检出率94.3%(233/247),从病死猪病料中检出20株,检出率为51.3(20/39),说明致病性大肠杆菌是引起仔猪腹泻的主要病原,但不同猪场检出率差异明显。血清型鉴定,该地区存在的血清型有O8、O54、O139、O141、O138、O147、O9、O111、O145、O20、O101、O45等12种,其中O8、O139、O141、O138、O111菌株共191株,占244株鉴定出血清型菌株的78.3%,为该地区流行优势血清型。用甘露糖敏感性血凝试验(MSHA)及抗甘露糖血凝试验(MRHA)检测了10株O138及10株O141菌株菌毛类型。MSHA结果表明,20株细菌均可凝集兔、豚鼠、人、鸡、绵羊红细胞,说明其均可表达F1菌毛(I型菌毛);MRHA结果表明,8株O138和7株O141菌株均可凝集豚鼠、鸡红细胞,说明产生的菌毛为F4(K88)。用加热法提取的菌毛制备油包水型油乳佐剂苗,以98%菌毛抗原、2%土温-80作为水相,94%白油、6%司班作为油相,按1:1一次乳化完成,配比最佳,疫苗的各理化指标符合生物制品学要求;免疫家兔后其抗体滴度为1:64;用牛心琼脂培养,菌毛对豚鼠红细胞的凝集价达1:640,说明牛心琼脂培养基能更好地表达F4菌毛。采用NCCLS颁布的标准方法,对170株地方优势流行菌株进行了14种抗生素敏感试验,结果表明,所有菌株均存在不同程度的耐药现象,对青霉素、氨苄青霉素、链霉素、四环素的耐药率分别高达87.1%、80.6%、62.9%、56.5%。耐2~12种抗生素的菌株数分别是8、20、39、38、25、17、8、6、5、2、2株,其中4重、5重、6重耐药的菌株共102株,占总菌株的60.0%。试验表明,该地区优势流行菌株对多黏菌素B、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星等比较敏感。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 文献综述
  • 第一章 仔猪致病性大肠杆菌研究进展
  • 1.1 仔猪大肠杆菌病研究概况
  • 1.1.1 病原
  • 1.1.2 疾病分类及主要特征
  • 1.1.3 O 抗原的地域性
  • 1.1.4 致病机理
  • 1.2 大肠杆菌的耐药性及耐药性监测方法概述
  • 1.2.1 大肠杆菌的耐药性现状
  • 1.2.2 耐药性的产生机制
  • 1.2.3 控制大肠杆菌耐药性的方法
  • 1.2.4 耐药性检测方法概述
  • 1.3 仔猪大肠杆菌病的防治
  • 1.3.1 仔猪大肠杆菌病疫苗研究概况
  • 1.3.2 饲养管理应采取的措施
  • 1.3.3 药物预防和治疗
  • 1.3.4 微生态制剂预防
  • 试验研究
  • 第二章 仔猪致病性大肠杆菌分离及血清型鉴定
  • 2.1 材料
  • 2.1.1 培养基及试剂
  • 2.1.2 大肠杆菌标准抗O 血清
  • 2.1.3 实验动物
  • 2.1.4 被检材料
  • 2.2 方法
  • 2.2.1 菌株的分离、鉴定
  • 2.2.2 致病性试验
  • 2.2.3 大肠杆菌O 抗原血清型鉴定
  • 2.3 结果
  • 2.3.1 菌株检出情况
  • 2.3.2 血清型分布
  • 2.4 讨论
  • 2.5 小结
  • 第三章 粘附素性菌毛检测及油乳剂苗的研究
  • 3.1 材料
  • 3.1.1 培养基
  • 3.1.2 试剂
  • 3.1.3 试验动物
  • 3.1.4 菌株
  • 3.2 方法
  • 3.2.1 黏附素性菌毛类型鉴定
  • 3.2.2 菌毛抗原的提取
  • 3.2.3 菌毛浓缩及无菌检验
  • 3.2.4 菌毛油乳剂苗的制备
  • 3.2.5 油乳剂苗的理化性质、安全性测定及免疫
  • 3.2.6 菌毛表达效果及抗体滴度的测定
  • 3.3 结果
  • 3.3.1 血凝谱
  • 3.3.2 无菌检验结果
  • 3.3.3 疫苗理化性质
  • 3.3.4 菌毛表达及抗体滴度
  • 3.4 讨论
  • 3.5 小结
  • 第四章 大肠杆菌耐药性检测
  • 4.1 材料
  • 4.1.1 培养基
  • 4.1.2 药敏纸片
  • 4.1.3 菌种
  • 4.1.4 标准质控菌株
  • 4.2 方法
  • 4.2.1 NCCLS 标准方法
  • 4.2.2 质控操作
  • 4.2.3 结果判定
  • 4.3 结果
  • 4.3.1 质控界值
  • 4.3.2 耐药性检测结果
  • 4.3.3 多重耐药情况
  • 4.4 讨论
  • 4.5 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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