异枝麒麟菜(Eucheuma striatum)硫酸多糖的超声辅助提取工艺及抗氧化活性研究

异枝麒麟菜(Eucheuma striatum)硫酸多糖的超声辅助提取工艺及抗氧化活性研究

论文摘要

本文包括两部分,一部分是以南海大型经济海藻异枝麒麟菜(Eucheuma striatum)为原料,对其生物活性硫酸多糖的超声辅助提取工艺进行了优化,并对其分离纯化、理化性质进行分析测定,对多糖样品的体外抗氧化活性进行了初步的研究和探讨,为海藻资源的综合开发利用提供科研理论依据。另一部分是对瑶药翠云草石油醚萃取部位化学成分进行分离。对异枝麒麟菜硫酸酯多糖(ESSP)的超声辅助提取工艺进行研究,通过单因素实验和正交试验对该提取工艺进行优化。实验表明,超声时间是提取硫酸酯多糖的关键影响因素。最佳工艺条件为超声时间20min,超声功率150W,料液(水)比1:90(g/mL),多糖的提取率达48.14%,所得的多糖含量96.94%,硫酸酯基含量19.66%。并与热水提取法进行了比较,采用优化工艺提取的多糖提取率、多糖含量和硫酸酯基含量比热水提取法分别提高了12.08%、8.07%和1.41%。采用DEAE-52纤维素离子交换柱对粗多糖ESSP进行分离纯化,然后经交联琼脂糖凝胶Sephadrose CL-6B柱进一步纯化得到ESSP I、ESSP II,凝胶渗透色谱测定其相对分子量分别为:ESSP I的重均分子量Mw为2.0114×106Da; ESSPⅡ的重均分子量为Mw为1.185×106Da。红外谱图显示ESSP I和ESSP II均有多糖类物质的特征吸收峰。采用Fenton反应和邻苯三酚自氧化体系探讨了异枝麒麟菜多糖的体外抗氧化效果。结果发现异枝麒麟菜多糖具有较好的清除氧自由基O2·-的活性,尤其是其清除·OH的作用更加显著。实验发现异枝麒麟菜多糖纯化后的组分ESSPⅠ的抗氧化活性要比粗多糖高,而且多糖的作用活性与其浓度有剂量-效应关系。同时还对瑶药翠云草的石油醚萃取部位进行了分离,得到4个单体化合物,采用光谱分析和文献对照的方法对分离所得单体的结构进行鉴定,分别为:大黄素甲醚(1),红灰青素(2),木栓酮(3),β-谷甾醇(4)。以上化合物均为首次从该植物中分离得到。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 第一章 绪论
  • 1.1 多糖的研究概述
  • 1.1.1 多糖的提取工艺研究进展
  • 1.1.2 多糖的分离纯化研究
  • 1.1.3 多糖的纯度检测及分子量测定
  • 1.2 红藻多糖的研究现状
  • 1.2.1 红藻多糖的生理活性研究进展
  • 1.2.2 异枝麒麟菜的简介
  • 1.2.3 麒麟菜多糖的研究现状
  • 1.3 多糖抗氧化作用研究概述
  • 1.3.1 多糖抗氧化作用研究机理
  • 1.3.2 海藻多糖抗氧化作用研究进展
  • 1.4 本研究的意义、内容和目的
  • 1.4.1 本课题研究的意义
  • 1.4.2 本论文的创新点
  • 1.4.3 研究内容及研究目的
  • 第二章 超声辅助提取异枝麒麟菜硫酸酯多糖的工艺优化
  • 2.1 实验材料、试剂和仪器设备
  • 2.1.1 实验材料
  • 2.1.2 主要试剂
  • 2.1.3 主要仪器设备
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 提取工艺流程
  • 2.2.2 单因素实验
  • 2.2.3 正交试验
  • 2.2.4 超声辅助和热水提取法的比较
  • 2.2.5 多糖的分析方法
  • 2.3 结果与讨论
  • 2.3.1 超声辅助提取ESSP的单因素实验
  • 2.3.2 超声辅助提取ESSP的正交试验
  • 2.3.3 超声辅助和热水提取法的比较
  • 2.3.4 紫外光谱分析
  • 2.3.5 红外光谱分析
  • 2.4 本章小结
  • 第三章 异枝麒麟菜硫酸多糖的分离纯化、降解的初步研究
  • 3.1 实验材料、试剂和仪器设备
  • 3.1.1 实验材料
  • 3.1.2 主要试剂
  • 3.1.3 仪器设备
  • 3.2 实验部分
  • 3.2.1 海藻原料的实验前处理
  • 3.2.2 异枝麒麟菜硫酸多糖的提取
  • 3.2.3 异枝麒麟菜硫酸多糖的分离纯化
  • 3.2.4 纯度检测——凝胶色谱法
  • 3.2.5 相对分子量测定
  • 3.2.6 红外光谱(IR)分析
  • 3.2.7 异枝麒麟菜多糖降解的初步研究
  • 3.3 实验结果与讨论
  • 3.3.1 异枝麒麟菜多糖的DEAE离子柱层析分离纯化
  • 3.3.2 纯度检测及DEAE-52柱分离产物的凝胶柱层析
  • 3.3.3 凝胶渗透法测定相对分子量结果
  • 3.3.4 红外光谱(IR)分析
  • 3.3.5 异枝麒麟菜多糖的降解结果
  • 3.4 本章小结
  • 第四章 异枝麒麟菜硫酸多糖的体外抗氧化研究
  • 4.1 实验材料、试剂和仪器设备
  • 4.1.1 实验材料
  • 4.1.2 主要试剂及主要溶液的配置
  • 4.1.3 主要仪器
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 异枝麒麟菜多糖对羟基自由基(·OH)清除率的测定
  • -)清除率的测定'>4.2.2 异枝麒麟菜多糖对超氧阴离子自由基(O2·-)清除率的测定
  • 4.3 结果与讨论
  • 4.3.1 不同浓度多糖对羟基自由基(·OH)清除作用
  • -)清除作用'>4.3.2 不同浓度多糖对超氧阴离子自由基(O2·-)清除作用
  • 4.4 本章小结
  • 第五章 翠云草石油醚萃取部位的化学成分研究
  • 5.1 前言
  • 5.1.1 翠云草(Selaginella uncinata(Desv.)Spring)概况
  • 5.1.2 翠云草化学成分的研究进展
  • 5.1.3 本研究的意义和内容
  • 5.2 实验材料和仪器设备
  • 5.2.1 样品及实验材料
  • 5.2.2 仪器设备
  • 5.3 实验部分
  • 5.3.1 预实验
  • 5.3.2 化合物的分离
  • 5.3.3 化合物的物理常数与光谱数据
  • 5.4 结构鉴定
  • 5.5 实验小结
  • 结论与建议
  • 参考文献
  • 附录Ⅰ 化合物的图谱
  • 附录Ⅱ 硕士研究生在学期间发表的论文及科研成果
  • 致谢
  • 相关论文文献

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