论文摘要
目的:通过观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激人足细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的变化,探明AngⅡ刺激足细胞表达VEGF的机制,AngⅡ是否可以通过p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)信号通路调控足细胞VEGF的表达。方法:①AngⅡ分别以不同剂量(1nM、10nM、100nM)孵育足细胞,观察VEGFmRNA的表达水平;②根据实验①的结果确定AngⅡ刺激剂量孵育足细胞3、6、12、24小时,观察VEGFmRNA的表达水平;③以不同剂量含氯沙坦大鼠血清与100nM AngⅡ共同孵育足细胞,观察VEGFmRNA的表达水平;④以p38MAPK特异性抑制剂SB203580(1μM、5μM、10μM)预处理足细胞1小时后,加入100nMAngⅡ孵育足细胞24小时,观察足细胞VEGF及p38MAPK的表达水平。结果:①经不同剂量的AngⅡ刺激后足细胞VEGFmRNA表达呈剂量依赖性增加,10nM、100nM剂量组与正常组比较均有统计学意义(P＜0.05);②根据实验①的结果以100nM AngⅡ孵育足细胞3,6,12,24小时,发现VEGFmRNA表达呈时间依赖性增加,所有时间组与正常组比较均有统计学意义(P＜0.05);③含氯沙坦大鼠血清干预后,可以明显抑制AngⅡ刺激足细胞VEGFmRNA的表达,并呈剂量依赖性,中、大剂量组与刺激组比较均有统计学意义(P＜0.05):④经不同剂量的SB203580预处理足细胞1小时后,再以AngⅡ100nM孵育足细胞24小时,p38MAPK蛋白表达呈剂量依赖性减少,所有剂量组与刺激组比较均有统计学意义(P＜0.05),VEGFmRNA及蛋白表达也呈剂量依赖性减少,所有剂量组与刺激组比较均有统计学意义(P＜0.05)。结论:AngⅡ可以剂量及时间依赖性引起VEGF的表达增加;氯沙坦可以阻断AngⅡ对足细胞的作用,剂量依赖性使VEGF表达减少;SB203580通过阻断p38MAPK信号通路使足细胞VEGF表达减少;因此,我们认为AngⅡ可以通过p38MAPK信号通路调控足细胞VEGF的表达。
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