金银花质量控制关键技术与质量评价体系的研究

论文摘要

目的:在中医药学理论和实践的指导下,从金银花本草考证开始,进行系统的资源考察、品种鉴定、质量评价方法与指标、指纹图谱、农残与重金属、以及与金银花药材质量相关的其他研究,寻找并逐步建立更为完善、可靠、科学的中药材质量评价方法,建立金银花质量控制关键技术与质量评价体系。实现中药质量的安全、有效、稳定、可控,实现中药现代化,为中药走向世界奠定良好的基础。方法:结合当前国内外中药质量控制和指纹图谱研究的进展,本课题采用电泳技术和RAPD标记方法对金银花两品系的DNA指纹图谱进行分析,从分子水平上为栽培品种的分类与鉴别提供依据;采用HPLC定性定量分析分别考察不同产地、不同采收期、不同产地加工方法、不同贮藏时间与金银花药材质量的相关性研究;进行金银花药材的常规检查:建立金银花HPLC指纹图谱;构建金银花质量控制规范草案并起草说明。成果与结论:本课题首次采用RAPD标记方法对不同品种金银花的DNA指纹图谱进行了分析,从分子水平上进行了遗传标记研究,为金银花的物种资源描述、评价及鉴定提供了依据。验证了“道地”药材的优势,优选出了最佳采收期、最佳加工方法、最佳贮藏时间,为GAP基地建设提供了数据支撑与技术支撑。建立了全国不同产地的金银花指纹图谱共有峰16个,山东金银花指纹图谱共有峰19个,并且首次在金银花HPLC指纹图谱中标定出绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、槲皮素等5个已知峰。首次对金银花中六六六(总BHC)、滴滴涕(总DDT)、五氯硝基苯(PCNB)3种农残进行了含量检测分析,为药典金银花农残限量标准的界定提供数据支持,建立了金银花质量控制规范草案。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 国内外文献综述
• 1 本草考证研究
• 2 影响金银花产量、质量的因素
• 2.1 产地、生境
• 2.2 采收期对产量与质量的影响
• 2.3 施肥对产量和质量的影响
• 2.4 加工干燥对质量的影响
• 3 化学成分
• 3.1 挥发油类
• 3.2 黄酮类
• 3.3 有机酸类
• 3.4 三萜类
• 3.5 无机元素
• 3.6 其它
• 4 药理药效研究
• 4.1 抗病原微生物作用
• 4.2 对心血管系统的作用
• 4.3 抗炎作用
• 4.4 保肝作用
• 4.5 止血作用
• 4.6 抗生育作用
• 4.7 对免疫系统的作用
• 4.8 抗氧化作用
• 4.9 其它作用
• 5 指纹图谱
• 5.1 薄层色谱（TLC）指纹图谱
• 5.2 红外光谱（IR）指纹图谱
• 5.3 高效液相色谱（HPLC）指纹图谱
• 5.4 气相色谱（GC）指纹图谱
• 5.5 高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱
• 5.6 生物指纹图谱
• 6 小结
• 第二部分 山东金银花资源考察与生物鉴别研究
• 1 山东金银花资源考察
• 1.1 山东金银花资源分布情况
• 1.2 山东金银花生产情况
• 2 同工酶分析鉴别研究
• 2.1 实验材料
• 2.2 仪器与试剂
• 2.3 实验方法
• 2.4 电泳指纹图谱构建与分析
• 2.5 小结与讨论
• 3 金银花RAPD分析
• 3.1 实验材料
• 3.2 仪器与试剂
• 3.3 DNA的提取
• 3.4 PCR条件与电泳
• 3.5 小结与讨论
• 第三部分 金银花不同产地与药材质量的相关性研究
• 1 仪器、试剂与实验材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂与试药
• 2 不同产地金银花样品（2005年采）中绿原酸的含量测定
• 2.1 色谱条件
• 2.2 方法学的考察
• 2.3 样品的测定
• 3 不同产地金银花（2005年采）中木犀草苷的含量测定
• 3.1 色谱条件
• 3.2 方法学考察
• 3.3 不同产地金银花（2005年采）中木犀草苷的含量
• 4 不同产地金银花（2005年采）中芦丁的含量测定
• 4.1 色谱条件
• 4.2 样品的测定
• 5 不同产地金银花样品中总灰分、酸不溶性灰分的含量
• 5.1 试验仪器和试药
• 5.2 试验方法
• 5.3 不同产地金银花（2005年采）中总灰分、酸不溶灰分的含量
• 6 小结
• 第四部分 金银花不同采收期与药材质量的相关性研究
• 1 仪器、试剂与实验材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂与试药
• 2 不同采收期金银花（2006.5采）中绿原酸的含量测定
• 2.1 色谱条件
• 2.2 方法学的考察
• 2.3 不同采收期金银花（2006.5采）中绿原酸的含量测定
• 3 不同采收期金银花（2006.5年采）中木犀草苷的含量测定
• 3.1 色谱条件
• 3.2 方法学的考察
• 3.3 不同采收期金银花（2006.5采）中木犀草苷的含量
• 4 不同采收期金银花（2006.5年采）中芦丁的含量测定
• 4.1 色谱条件
• 4.2 样品的测定
• 5 不同采收期金银花样品中总灰分、酸不溶性灰分的含量
• 5.1 试验仪器和试药
• 5.2 试验方法
• 5.3 不同采收期金银花（2006.5采）中总灰分、酸不溶灰分的含量
• 6 小结
• 第五部分 金银花产地加工方法与药材质量的相关性研究
• 1 实验材料、仪器与试剂
• 2 不同加工方法金银花样品中绿原酸的含量测定
• 2.1 色谱条件
• 2.2 方法学的考察
• 2.3 样品测定
• 3 不同加工方法金银花中木犀草苷的含量测定
• 3.1 色谱条件
• 3.2 方法学的考察
• 3.3 样品测定
• 4 小结
• 第六部分 金银花贮藏时间与药材质量的相关性研究
• 1 仪器、试剂与实验材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂与试药
• 2 不同贮藏期金银花中绿原酸的含量测定
• 2.1 色谱条件
• 2.2 方法学的考察
• 2.3 不同储藏期金银花中绿原酸的含量测定
• 3 不同贮藏期金银花中木犀草苷的含量测定
• 3.1 色谱条件
• 3.2 方法学的考察
• 3.3 不同贮藏期金银花中木犀草苷的含量
• 4 不同贮藏期金银花中芦丁的含量测定
• 4.1 色谱条件
• 4.2 样品的测定
• 5 小结
• 第七部分 金银花常规检查项目研究
• 1 水分测定
• 1.1 实验材料
• 1.2 仪器、试药
• 1.3 试验方法
• 1.4 实验内容
• 1.5 小结
• 2 总灰分、酸不溶灰分测定
• 2.1 试验材料
• 2.2 仪器、试药
• 2.3 试验方法
• 2.4 实验内容
• 2.5 小结
• 3 农残的检测
• 3.1 实验仪器与试剂
• 3.2 实验材料
• 3.3 测定方法
• 3.4 结果
• 3.5 小结
• 4 重金属的检测
• 4.1 铅、镉、铜、汞、砷的检测
• 4.2 结果
• 4.3 小结
• 5 氨基酸分析
• 5.1 实验材料
• 5.2 实验方法
• 5.3 小结与讨论
• 第八部分 金银花药材的指纹图谱研究
• 1 仪器、试剂与实验材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 实验材料
• 2 实验方法的优选
• 2.1 提取时间的优选
• 2.2 提取溶剂的优选
• 3 色谱条件优选
• 3.1 梯度洗脱条件的选择
• 3.2 检测波长的选择
• 3.3 色谱柱的选择
• 4 方法学的考察
• 4.1 标准品的考察
• 4.2 精密度的考察
• 4.3 稳定性的考察
• 4.4 重复性的考察
• 5 指纹图谱的建立
• 5.1 样品分析
• 5.2 共有指纹峰的标定
• 5.3 共有峰保留时间的比值（RT）
• 5.4 共有峰面积的比值（RA）
• 5.5 非共有峰面积
• 5.6 相似度的计算结果
• 6 山东道地药材金银花指纹图谱的建立
• 6.1 药材来源
• 6.2 山东金银花共有指纹峰的标定
• 6.3 山东金银花共有峰保留时间的比值（RT）
• 6.4 共有峰面积的比值（RA）
• 6.5 非共有峰面积
• 6.6 相似度的计算结果
• 7 讨论
• 第九部分 金银花药材质量控制规范（草案）及起草说明
• 金银花药材质量控制规范（草案）
• 金银花药材质量控制规范（草案）起草说明
• 第十部分 课题创新点
• 第十一部分 社会经济效益分析及推广应用前景
• 1 社会、经济效益
• 1.1 为金银花药材GAP基地产出优质、高产的药材提供了关键技术
• 1.2 增加金银花产区农民收入,提高农业经济增长点
• 1.3 加速山东金银花现代化、国际化进程
• 2 推广应用前景
• 第十二部分 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 查新报告
• 论文著作
• 科研课题