论文摘要
背景: Her-2/neu基因的扩增存在于20-30%的乳腺癌中,Her-2/neu基因扩增与乳腺癌患者预后呈负相关,且与激素治疗及化学治疗的耐药相关,因此,Her-2/neu被认为是一个重要的分子标志,作为乳腺癌的一个独立预后指标对Her-2/neu基因进行检测,具有指导临床治疗的重要意义。 赫赛汀（Herceptin）是针对Her-2/neu受体的人源化单克隆抗体,可特异性结合p185HER-2/neu的胞外区域,明显抑制Her-2/neu扩增或过表达的乳腺癌细胞的生长,用于治疗Her-2/neu阳性的乳腺癌患者,因此对Her-2/neu基因的检测,对指导赫赛汀的使用有重要意义。 荧光原位杂交（FISH）广泛应用于中期及间期细胞的基因扩增、突变、易位等遗传学改变的研究中,福尔马林固定、石蜡包埋组织的FISH技术的建立及完善,为Her-2/neu基因扩增的检测提供了检测平台。 目的: 1.探讨福尔马林固定、石蜡包埋组织的Her-2/neu基因扩增的FISH方法检测的最佳实验条件。2.FISH方法检测淋巴结阳性乳腺癌的Her-2/neu基因表达。3.Her-2/neu基因扩增的FISH检测方法在组织芯片上的应用。4.探讨乳腺穿刺细胞学涂片的Her-2/neu基因扩增的FISH检测方法。 方法: 应用球面对称设计对福尔马林固定、石蜡包埋组织的FISH技术中的切片厚度X1、NaSCN处理温度X2、蛋白酶K消化时间X3及变性温度X4共4个关键因素进行组合试验,拟合出该4个因素与FISH质量之间的关系,对FISH技术进行优化。 选取40例淋巴结阳性的乳腺癌病例,采用FISH方法检测Her-2/neu基因的表达,以及免疫组化方法检测C-erbB-2、ER、PR的表达,分析Her-2/neu基因的表达与临床指标、生存率、ER和PR表达之间的相关性,比较FISH与免疫组化两种方法检测Her-2/neu扩增的差异;将32例乳腺良性病变制作
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