论文摘要
目的:研究顺铂耐药卵巢癌细胞系COC1/DDP中多药耐药相关蛋白2（MRP2）基因以及谷胱甘肽转移酶π（GSTπ）基因的表达,探讨两种基因的反义寡核苷酸对COC1/DDP细胞铂类耐药的逆转作用。 方法:将人工合成的反义、错义硫代脱氧寡核苷酸经脂质体包裹转染COC1/DDP细胞后,用MTT体外药敏检测法观察COC1/DDP细胞耐药性的变化,应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测多药耐药相关蛋白基因（MRP2）以及谷胱甘肽转移酶基因（GSTπ）mRNA水平表达的改变,同时通过Western blotting的方法检测两种基因蛋白表达的变化。 结果:（1）COC1/DDP细胞中,MRP2与GSTπ基因均有表达,其mRNA相对表达值分别为0.42±0.05和0.78±0.13。而亲代COC1细胞中两种基因均无表达。（2）将GSTπ反义寡核苷酸转染COC1/DDP细胞后,GSTπ的mRNA水平降低（P<0.05）,其蛋白表达明显降低,顺铂对COC1/DDP细胞的抑制率明显提高,具有显著性差异（P<0.05）。（3）将MRP2反义寡核苷酸转染COC1/DDP细胞后,MRP2基因在mRNA水平（P<0.05）及蛋白水平的表达均明显下降,耐药细胞的耐药性降低（耐药指数）具有显著差异。（4）转染错义寡核苷酸组,MRP2、GSTπ表达改变差异无显著性。体外耐药试验显示,转染错义寡核苷酸组与未转染组COC1/DDP耐药性无显著性差异。 结论:（1）GSTπ和MRP2基因高表达与卵巢癌COC1细胞获得顺铂耐药性有密切关系。（2）GST-ASODN及MRP2-ASODN均能特异并有效地逆转COC1/DDP细胞系对顺铂的耐药性,提高其化疗敏感性。
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