论文摘要
目的：①在实验条件下考察猪传染性胸膜肺炎放线杆菌对盐酸头孢噻呋的耐药情况，在此基础上进行盐酸头孢噻呋和鱼腥草联合应用的体外药效学研究；②根据兽医临床联合用药的目的，制备盐酸头孢噻呋和鱼腥草的复方油性混悬剂；③利用药物动力学的方法考察该复方盐酸头孢噻呋混悬剂是否具备缓释长效的特点。方法：①体外研究部分：利用MIC倍倍递增法，用盐酸头孢噻呋体外诱导敏感猪胸膜肺炎放线杆菌APP-0成为耐药子代APP-Y100，通过MIC，形态学，耐药稳定性，生长动力学和体内、外药效学研究观察生物学特性变化；②制剂研究部分：采用正交设计法，筛选合适的药物辅料，以研钵研磨分散法制备混悬剂，然后考察样品沉降比、含量、外观性状、粒径等各项指标。③药物动力学研究部分：36只SPF大鼠随机平均分成3组，A组：单剂量注射复方盐酸头孢噻呋混悬剂[50mg/（kg·b·w）]；B组单剂量注射盐酸头孢噻呋混悬剂[50mg/（kg·b·w）]；C组单剂量注射头孢噻呋钠粉针[50mg/（kg·b·w）]。采用反相高效液相色谱内标法测定血浆药物浓度，血浆浓度最低检测限为0．1mg／L，并以DAS2．0药动学程序和SPSS（11．0）统计软件对所得数据进行分析。结果：①头孢噻呋对耐药子代APP-Y1 00的MIC比APP-0提高了128倍，无药培养30代后，MIC为APP-0的64倍。在头孢噻呋的压力下，APP菌体由球杆状变为杆状，个体变大。无头孢噻呋的压力下，敏感母体和耐药子代倍增呈现无显著性差异（P>0．05），而有头孢噻呋环境下存在显著性差异（P<0．05）。体内试验，低、高剂量组APP-0和APP-Y100的小白鼠存活率分别为80％、100％和0％、80％。②正交实验显示最佳组合为A2B2C3，测定复方头孢噻呋混悬剂的沉降体积比为90．4％，制剂重分散性良好，粒径在2．0～1 0．0μm占74．5％，相对含量6个月仍维持在98％以上，外观均无大的变化，并且通针性良好，对高温、高湿稳定，能顺利进行肌肉注射；③A、B、C组药时数据均符合一级吸收二室模型（权重=1／cc），主要动力学参数及拟合方程如下：A组：T1／2Ka为（1．253±0．100）h,T1/2α为（1．532±0．191）h，T1/2β为（15．321±3．755）h，Tpeak为（2．000±0．000）h，Cmax为（35．203±5．732）mg／L，AUC为（229．51±18．278）mg/L·h，Ka为（0．556±0．046）l／h，MRT0→48（h）为（8．049±0．274）h，拟合方程为：C=313．754e-0.458t+4．249e-0.047t-318．003e-0.556t。B组：T1／2Ka为（0．341±0．090）h,T1/2α为（1．734±0．300）h，T1／2β为（10．186±1．842）h，Tpeak为（1．000±0．000）h，Cmax为（43．919±1．51）mg／L，AUC为（188．488±9．611）mg／L·h，Ka为（2．154±0．673）l／h，MRT0→48（h）为（6．872±0．449）h，拟合方程为：C=52．917e-0.407t+5．651e-0．069t-58．568e-2.154t。C组：T1／2Ka为（0．044±0．012）h,T1/2α为（0．456±0．079）h，T1／2β为（0．983±0．010）h，Tpeak为（0．167±0．000）h，Cmax为（159．091±19．971）mg/L，AUC为（128．554±6．625）mg／L·h，Ka为（16．340±3．844）1／h，MRT0→48（h）为（0．911±0．059）h，拟合方程为：C=123．222e-1.550t+5．651e-0.705t-128．873e-16.340t。结论：①本试验用MIC倍倍递增法，在头孢噻呋压力下，成功诱导出耐头孢噻呋的耐药菌株，其耐药性通过体内外试验获得证实。②鱼腥草油与头孢噻呋对耐药的猪胸膜肺炎放线杆菌菌株有协同作用，对原代菌有相加作用。③采用A2B2C3处方成功研制了复方盐酸头孢噻呋混悬注射剂，其物理稳定性良好，能顺利进行肌肉注射。④复方盐酸头孢噻呋混悬剂肌肉注射后，其药物动力学特征表现为吸收缓慢，血药浓度平稳，消除半衰期延长，生物利用度高等特点，在临床上1d注射1次，连用3d，可以维持有效血液浓度。