正—反相正交二维液相色谱系统构建及评价

论文摘要

二维液相色谱具有极高的峰容量和分离选择性,在蛋白质组、天然产物等复杂样品的研究中正发挥着重要作用。本文构建了第一维为正相色谱,第二维为反相色谱,定量环一十通阀作为切换接口的在线二维液相色谱系统。通过减小定量环的容积,并在系统的第一维正相系统引入1,4-二氧六环与正已烷混合组成流动相,成功的解决了系统流动相互溶性的难题。将柱温升高到60℃,不仅使流动相的兼容性进一步改善,也可以有效提高分析速度。使用此系统对正天丸样品进行分离分析,共检测出色谱峰733个,系统总峰容量为1470。为增加第二维反相系统的分离能力,采用串联色谱柱的方法,共检测出色谱峰876个,系统总峰容量达1740。构建的系统及采用的方法发展策略为多维分离系统的流动相选择提供了一条新思路。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 二维液相色谱的原理
• 1.2.1 二维液相色谱的概念与原理
• 1.2.2 二维液相色谱系统的构成
• 1.2.3 二维液相色谱分离模式以及耦联方式
• 1.3 NPLC×RPLC二维液相色谱系统
• 1.3.1 NPLC×RPLC的优势
• 1.3.2 NPLC×RPLC的应用
• 1.3.3 NPLC×RPLC构建的技术难点
• 1.4 多维色谱系统在中药分析中的应用
• 1.5 本论文的工作
• 2 NPLC×RPLC二维液相色谱系统构建
• 2.1 引言
• 2.2 仪器与试剂
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 试剂
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 二维液相色谱系统的构建策略与流程
• 2.3.2 分离模式的选择
• 2.3.3 接口设计
• 2.3.4 系统流程图
• 2.3.5 流动相选择
• 2.3.6 第二维 RPLC升高柱温
• 2.3.7 对流动相互溶性的考察
• 2.4 本章小结
• 3 正天丸样品预处理条件优化
• 3.1 引言
• 3.2 仪器与试剂
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 样品与试剂
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 索氏提取条件选择
• 3.3.2 超声提取条件的选择
• 3.4 本章小结
• 4 NPLC×RPLC二维液相色谱系统评价
• 4.1 引言
• 4.2 仪器与试剂
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 样品与试剂
• 4.3 实验结果与讨论
• 4.3.1 系统流程
• 4.3.2 二维分离系统的评价标准
• 4.3.3 正天丸样品检测色谱条件确定
• 4.3.4 样品的二维液相色谱分离分析
• 4.6 本章小结
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献