里氏木霉Rut C-30产非淀粉多糖酶系分析及木聚糖酶优良菌株选育

论文摘要

本文以里氏木霉Rut C-30为出发菌株,对其产生的非淀粉多糖酶系进行分析,通过UV诱变选育出产木聚糖酶的优良菌株。 里氏木霉Rut C-30以稻草和麸皮为基质进行固体发酵,通过不同碳源及添加不同诱导物对其产生的纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-甘露聚糖酶、果胶酶五种不同的非淀粉多糖酶进行分析,结果表明里氏木霉Rut C-30产生的非淀粉多糖酶系较全,不同的碳源及添加不同诱导物进行固体发酵,可以改变发酵过程中产生的非淀粉多糖酶系的比例。 里氏木霉Rut C-30的新鲜孢子通过紫外线照射,进行诱变育种,选育出产木聚糖酶的优良菌株。在含有木聚糖的初筛培养基中,挑选生长快的菌落,作为复筛菌株,再接种到250mL的三角瓶固体发酵培养基中进行复筛。筛选到一菌株,其酶活比出发菌株提高了41.9%。 以碳源、氮源、干料与水分的比例、培养时间、培养温度和无机盐为因素对选育出的菌株进行发酵条件研究。结果表明,最佳稻草与麸皮比为6:4;最适氮源为硫酸铵,其添加量2.0%时酶活最高;干料与水分的最适比为1:3.0;正交实验表明培养时间对产酶影响最大,其次是KH2PO4和MgSO4·7H2O,培养温度对酶活影响最次。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 一 前言
• 1 非淀粉多糖
• 1.1 非淀粉多糖的定义
• 1.2 非淀粉多糖的分类
• 1.3 非淀粉多糖的化学结构
• 1.3.1 纤维素
• 1.3.2 果胶多糖
• 1.3.3 β-葡聚糖
• 1.3.4 木聚糖
• 1.3.5 甘露聚糖
• 1.4 非淀粉多糖抗营养作用机理
• 2 稻草、麸皮中可溶性非淀粉多糖及单糖含量
• 3 非淀粉多糖酶
• 3.1 纤维素酶
• 3.2 木聚糖酶
• 3.3 β-葡聚糖酶
• 3.4 β-甘露聚糖酶
• 3.5 果胶酶
• 3.6 非淀粉多糖酶的应用
• 4 研究目的和意义
• 二 里氏木霉Rut C-30产非淀粉多糖酶系的分析
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料、仪器
• 1.1.1 菌种
• 1.1.2 底物
• 1.1.3 培养基
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 斜面培养
• 1.2.2 接种孢子的制备
• 1.2.3 固体发酵培养
• 1.2.4 粗酶液的制备
• 1.2.5 酶活测定方法
• 1.2.6 标准溶液的制备
• 2 结果与讨论
• 2.1 葡萄糖标准曲线
• 2.2 木糖标准曲线
• 2.3 里氏木霉Rut C-30在不同碳源中的酶系情况
• 2.4 添加不同诱导物对其酶系的影响
• 3 小结
• 三 紫外线诱变里氏木霉Rut C-30提高木聚糖酶活力及发酵条件的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料、仪器
• 1.1.1 出发菌株及其来源
• 1.1.2 底物
• 1.1.3 培养基
• 1.1.4 实验主要采用的仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 菌株的诱变
• 1.2.2 发酵产酶条件优化实验
• 1.2.3 木聚糖酶活测定方法
• 1.2.4 木糖标准曲线的制备
• 2 结果与讨论
• 2.1 木糖标准曲线
• 2.2 菌株筛选
• 2.2.1 粗筛
• 2.2.2 复筛
• 2.3 优化培养基
• 2.3.1 稻草与麸皮比例对菌株产木聚糖酶的影响
• 2.3.2 培养基中不同氮源对产酶的影响
• 2.3.3 硫酸铵的最适添加量
• 2.3.4 培养基中加水比对产酶的影响
• 2.3.5 正交实验优化发酵培养基
• 3 小结
• 四 结论和建议
• 1 结论
• 2 建议
• 参考文献
• 致谢