油茶籽壳抗氧化组分的提取与分离研究

论文摘要

油茶籽榨油后会产生大量的废油茶壳,综合利用这些废油茶籽壳,既能有效解决废物污染的问题,又能提高油茶的经济效益,从而变废为宝。本研究从油茶籽壳不同溶剂提取物的抗氧化活性测定、优化多酚物质提取工艺、以及对抗氧化组分初步定性分析三个方面做了如下研究：首先,油茶籽壳经乙酸乙酯、丙酮、甲醇、水四种溶剂分级提取,回收溶剂得到相应的溶剂提取物EAE、AE、ME、WE,分别测定了这四种提取物中多酚含量、黄酮含量、对ABTS·+的清除能力以及对DPPH·的清除能力。结果发现：溶剂极性越大,提取的固形物就越多,但极性最大的水溶剂的提取物多酚、黄酮含量较低；而溶剂极性居中的ME和AE多酚、黄酮含量都相对较高；溶剂极性最弱的乙酸乙酯的提取物虽得率最少,但黄酮含量最高且高达72.17%,几乎是AE和ME的两倍,而且无论是对ABTS·+的清除还是对DPPH·的清除,EAE都是清除能力最佳的,其对应的IC50分别是36.2μg/mL、180.3μg/mL,大约是AE、ME的两倍,WE的七倍,与没食子酸（GA）的清除能力相当。此外四种溶剂提取物清除自由基的能力与多酚和黄酮含量呈现正相关,其中黄酮相关性较高（R2黄酮值高于0.8）。其次,选择合适极性的提取溶剂,通过单因素试验、响应面回归设计对油茶籽壳溶剂浸提多酚工艺做了优化,得到如下结论：常温避光条件下,质量浓度为54%的乙醇浸提茶籽壳多酚,液料比为35：1,浸提110min,测得油茶籽壳中的多酚含量为12.2167 mg/g。最后,通过颜色反应鉴别其中的主要活性成分种类为黄酮和鞣质。薄层层析、高效液相色谱法对油茶籽壳分级提取物中的抗氧化活性组分进行了分离分析。颜色反应最显著的是甲醇提取液（ME）,经薄层层析,分离出隐约的三个点,既不是没食子酸也不是芦丁,但有黄酮类化合物的特定的荧光；HPLC的进一步分析显示,乙酸乙酯提取物（EAE）芦丁含量较高；丙酮提取物（AE）含有没食子酸、芦丁,没食子酸量相对较高；甲醇提取物（ME）成分复杂,主要物质是香豆素和芦丁；而水提取物（WE）也含有部分没食子酸和香豆素；乙醇-水提取物含有没食子酸、芦丁和香豆素。从上述三部分试验结果可以看出,油茶壳提取物抗氧化能力较强,多酚和黄酮类活性成分丰富,可以考虑从提取活性成分的角度对油茶籽壳进行综合开发利用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 自由基与抗氧化
• 1.1.1 自由基
• 1.1.2 抗氧化活性成分
• 1.2 油茶籽壳研究现状
• 1.2.1 工业原料
• 1.2.2 农业栽培
• 1.2.3 活性成分研究
• 1.3 立题意义及研究内容
• 2 油茶籽壳提取物抗氧化活性研究
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 材料与试剂
• 2.1.2 仪器
• 2.1.3 试验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 不同溶剂提取物的得率、多酚及黄酮含量
• 2.2.2 ABTS法测总抗氧化
• 2.2.3 清除DPPH自由基能力
• 2.2.4 抗氧化能力与多酚、黄酮含量的相关性
• 2.3 本章小结
• 3 油茶籽壳活性成分的最佳提取工艺
• 3.1 试验材料与方法
• 3.1.1 材料与试剂
• 3.1.2 仪器
• 3.1.3 试验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 没食子酸标准曲线
• 3.2.2 提取溶剂的选择
• 3.2.3 液料比单因素试验
• 3.2.4 溶剂浓度单因素试验
• 3.2.5 提取时间单因素试验
• 3.2.6 响应面法分析
• 3.3 本章小结
• 4 油茶籽壳抗氧化组分的初步鉴定
• 4.1 试验材料与方法
• 4.1.1 材料与试剂
• 4.1.2 仪器
• 4.1.3 试验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 颜色反应结果
• 4.2.2 薄层层析分析
• 4.2.3 液相色谱分析
• 4.3 本章小结
• 结论
• 展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间的主要学术成果