论文摘要
槲皮素是人类膳食中常见的黄酮类化合物,广泛存在于各种植物中,它具有抗氧化、抗肿瘤、清除自由基等多方面的生物学作用。关于槲皮素的研究已经是近年来国内外学者研究的热点。钼属稀土元素,是人体内的必须微量元素之一,在机体内常常作为酶的辅助因子发挥作用。近年来,在研究中药的过程中发现越提纯疗效越差甚至出现毒副作用的现象,为此,北京大学曹治权教授于1995年提出中药配位学说。该学说认为,天然药物的药理活性大都是其有机物与矿物质之间形成配合物而产生的协同作用。虽然关于槲皮素与过渡元素形成配合物的合成及生物活性研究已有相关报道,但槲皮素与过渡元素钼的合成及其活性研究尚未见报道。本研究在前人工作的基础上采用单因素法及多因素正交实验法对槲皮素与钼反应的最佳摩尔比、pH值、温度、时间进行了研究,在最佳反应条件下合成出槲皮素-钼（Ⅵ）配合物,并对其合成产物的紫外光谱、红外光谱、配位比、急性毒性、遗传毒性、抗超氧阴离子自由基（O2-·）及羟基自由基（·OH）的性质进行了测定。目的1、探讨槲皮素与钼（Ⅵ）的最佳反应条件,合成槲皮素-钼（Ⅵ）配合物并对其紫外、红外光谱及配位比进行测定,推测其可能的结构;2、对其目的产物槲皮素-钼（Ⅵ）配合物的毒性进行测定;3、初步探讨槲皮素-钼（Ⅵ）配合物对O2-·和·OH的清除作用。方法1、以槲皮素和钼酸铵为原料,分别采用单因素实验法和正交实验法综合考察槲皮素-钼（Ⅵ）配合物合成的最佳酸度、原料的物质量比、反应温度、反应时间。在最佳条件下,合成出槲皮素-钼（Ⅵ）配合物,并对其结构进行表征;2、分别采用小鼠急性毒性试验和小鼠骨髓细胞微核实验考察槲皮素-钼（Ⅵ）配合物的急性毒性和遗传毒性;3、分别采用邻苯三酚自氧化法和水杨酸法观察槲皮素-钼（Ⅵ）配合物对O2-·和·OH的清除作用,并与槲皮素进行比较;4、数据用（?）±s表示,采用SPSS12.0统计软件,对实验动物体重进行t检验,对骨髓细胞微核率进行x2检验。检验水准α=0.05。结果1、槲皮素和钼（Ⅵ）在pH为2.0的反应溶液中,以物质的量比1.5:2.0（槲皮素和Mo（Ⅵ））,30℃反应8h,配合物合成产率最大,约达到90%。并通过紫外光谱、红外光谱及配位比分析推测出配合物的结构;通过摩尔比法和平衡移动法计算出槲皮素-钼（Ⅵ）配合物的表观稳定常数为K稳=1.0×108;2、急性毒性实验期间未观察到小鼠有死亡及任何中毒表现,且槲皮素-钼（Ⅵ）配合物对小鼠经口LD（50）大于10.00g·kg-1;骨髓细胞微核率经x2检验,阳性对照组高于阴性对照组和实验组（P＜0.05）,实验组与阴性对照组微核率均在正常值范围内,二者差异无统计学意义（x2=3.288,P=0.511）;3、在低浓度时,槲皮素-钼（Ⅵ）配合物对O2-·的清除作用高于槲皮素,在高浓度时,槲皮素-钼（Ⅵ）配合物对O2-·的清除作用低于槲皮素。对·OH的清除作用受浓度影响较大,不论高浓度还是低浓度,槲皮素-钼（Ⅵ）配合物的清除作用均优于槲皮素。结论1、本研究建立了槲皮素与钼（Ⅵ）的最佳配位反应条件,在此条件下,合成出槲皮素-钼（Ⅵ）配合物,并推测出其结构;2、新合成的槲皮素-钼（Ⅵ）配合物未发现急性毒性和遗传毒性,且具有较强的清除O2-·和·OH的作用。