论文摘要
兰科（Orchidaceae）植物是被子植物中的一个大家族,不少种类具有极高观赏和药用价值。但由于多种原因,包括华石斛（Dendrobium sinense）在内的一些野生兰科植物资源日益枯竭,是植物保护中的“旗舰”类群。而兰科植物是典型的菌根植物,具有伴菌萌发和菌根营养的习性,共生真菌对其生长发育具有极其重要的作用。因此,从共生真菌的角度研究和保护濒危野生兰科植物具有非常重要的意义。为探索共生真菌在华石斛繁殖、栽培和保育中的应用,本研究从野生华石斛原球茎中分离获得内生真菌,将真菌回接华石斛,筛选华石斛有益共生真菌,并探讨了华石斛共生真菌的生物学特性。其主要研究结果如下：（1）以植物生物生长指标、叶绿素含量为筛选指标,筛选出S3、S7、S9、S10、S125株促进华石斛生长,并不同程度提高了植株叶绿素的有益共生真菌。不同菌株对华石斛的促生作用不同,同种菌株对华石斛不同生长阶段作用效果亦不同。（2）初步建立了华石斛与共生真菌的共生培养体系。华石斛组培苗与真菌共生培养基为：1／2MS+蔗糖7.5g／L+琼脂12g/L, pH5.8。添加了真菌诱导子的MS和1／2MS培养基有利于华石斛原球茎生长,200ml／L真菌诱导子促生效果较好。华石斛盆苗根部施液体菌剂可明显促进植株生长发育,此方法操作简单、成本低,可应用于华石斛人工栽培。（3）华石斛共生真菌最适生长温度为25℃,生长温度范围为5～40℃之间,最低生长温度为5-15℃,最高生长温度为30～40℃,不同菌株生长适宜温度范围不同,当温度≦5℃或≧40℃时,真菌无法生长。华石斛共生真菌在含有机营养成分丰富的PDA和OMA培养基上生长较好；华石斛共生真利用碳源范围较广,可利用单糖、双糖、多聚碳水化合物的多种碳源,对麦芽糖、可溶性淀粉、羧甲基纤维素、蔗糖利用效果较好；对山梨糖醇利用效果较差,缺乏碳源对菌株生长无明显抑制作用；华石斛共生真菌对酵母膏、蛋白胨、甘氨酸、硝酸钠利用效果较好,对氨态氮利用效果较差；各菌株有自身的优势氮源,个别菌株对氮源有明确要求；除S12菌株外,无氮源菌株生长受抑制。华石斛共生真菌具有较强的溶磷能力,且溶磷能力与培养液pH下降有密切关系,在一定范围内,溶磷能力随着培养液pH值下降而增强,培养液磷含量、菌丝体磷含量与pH之间均呈极显著负相关。