益气活血法对脑出血大鼠血肿周围新生血管整合素表达的影响

论文摘要

目的脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）是中风的一种危重类型,近年来本病的入院率逐年增加但死亡率并未下降,已严重威胁国民健康和生存质量。针对脑出血,目前治疗主要是脱水降颅内压、手术清除血肿等对症处理,并无其他特异有效的方法。脑出血后患者中医辨证多有气虚血瘀证的表现,益气活血法是中医治疗脑出血后气虚血瘀证的重要治法,补阳还五汤是这一治法的代表方,在临床运用中疗效确切。整合素（integrin）是细胞粘附分子的一种,它通过介导细胞间、细胞—细胞外基质（extracelluar matrix,ECM）的粘附及信号传导,调节细胞的生物学行为,而目前整合素在中枢神经系统疾病血管新生中的研究多集中在脑肿瘤和脑缺血。本实验所在课题组前期研究证实脑出血后损伤区通过血管新生重建微血管系统。本实验用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,选益气活血法代表方补阳还五汤及其益气组分、活血组分拆方干预,观察脑出血大鼠血肿周围新生血管内皮不同整合素的表达,探讨益气活血法治疗脑出血的相关作用机制。方法150只SD大鼠随机分为模型组、假手术组、益气组、活血组、益气活血组,每组30只。通过立体定位仪向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U建立脑出血模型。假手术组注入等量生理盐水。益气活血组、益气组和活血组分别予补阳还五汤全方、补阳还五汤益气组分及补阳还五汤活血组分灌胃。假手术组和模型组大鼠灌服等量蒸馏水。采用免疫组织化学（immunohistochemistry）方法,并对结果进行半定量（semi-quantitative）分析,检测各组术后3、7、14、21、28天时血肿周围新生血管内皮不同整合素的时空表达。结果假手术组在不同时间点各整合素均未见明显表达。整合素β3、α1、α6亚基表达趋势分别与整合素αvβ3、α1β1、α6β1相似。整合素αvβ3和p3亚基在3天时即可在血肿周围查见,7天达到高峰,14-28天时表达平稳下降,益气活血组表达高峰持续至14天,并在多个时点表达高于同时点模型组。整合素α5亚基阳性微血管3天时即可在血肿周围查见,7-21天时持续表达增加,高峰从14天持续到21天,28天时表达下降,益气活血组在7-28天时均高于同时点模型组。整合素α1βl和α1亚基阳性表达3天时即可在血肿周围查见,7天时表达增高,14天达到高峰,14-28天高峰持续表达,益气活血组在7-28天表达高于同时点模型组。整合素α6β1和α6亚基阳性表达在3-7天时呈低水平,14天时表达增高达到高峰,高峰持续至28天,益气活血组在14-28天时表达高于同时点模型组。结论1.脑出血能导致大鼠血肿周围新生血管内皮细胞整合素表达改变。2.益气活血法能调节脑出血大鼠血肿周围新生血管内皮细胞不同整合素的表达,影响微血管系统重建,修复损伤组织。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 1. 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂及药品
• 1.3 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 脑出血动物模型制备
• 2.2 中药制备
• 2.3 动物分组与处理
• 2.4 免疫组织化学检测
• 2.5 图像分析
• 2.6 统计学方法
• 第三章 结果
• 1 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素aVβ3和β3现出亚基表达的影响
• 1.1 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素αVβ3表达的影响
• 1.2 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素β3亚基表达的影响
• 2 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α5亚基表达的影响
• 3 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α1β1和α1亚基表达的影响
• 3.1 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α1β1表达的影响
• 3.2 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α1亚基表达的影响
• 4 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α6β1和α6亚基表达的影响
• 4.1 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α6β1表达的影响
• 4.2 益气活血法对脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α6亚基表达的影响
• 第四章 讨论
• 1 不同的脑出血动物模型评价
• 1.1 Ⅶ型胶原酶诱导脑出血模型
• 1.2 自体血注入法脑出血模型
• 1.3 微球囊充胀法脑出血模型
• 1.4 自发性脑出血模型
• 2 不同整合素在脑出血大鼠脑内表达的规律
• 3和β₃亚基的表达'>2.1 脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素αvβ₃和β₃亚基的表达
• 5亚基的表达'>2.2 脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α₅亚基的表达
• 1β₁、α₆β₁和α₁、α₆亚基的表达'>2.3 脑出血后大鼠血肿周围新生血管内皮整合素α₁β₁、α₆β₁和α₁、α₆亚基的表达
• 3 益气活血法对整合素在脑出血大鼠脑内表达的影响
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 在校期间科研成果及发表论文