不同日粮精粗比及氮源对绵羊瘤胃纤维降解菌群和纤维物质降解的影响

论文摘要

本论文将传统微生物检测方法和现代分子生物学检测手段相结合,比较研究了不同精粗比和不同氮源日粮条件下主要纤维降解菌群的变化,并通过瘤胃发酵规律和纤维素酶活的检测来进一步探讨瘤胃微生物对纤维物质的降解机理。试验分两期进行。1.不同精粗比日粮对瘤胃纤维降解菌群和纤维物质降解的影响试验选用9只体况良好、体重50公斤左右的苏尼特绵羊随机分为三组,每组3只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组精粗比分别为1:9、3:7和5:5。通过传统检测方法检测不同精粗比日粮对瘤胃真菌、细菌浓度和数量的影响差异不显著（P﹥0.05）;密毛虫、双毛虫、头毛虫、总纤毛虫数量变化显著（P<0.05）,Ⅱ组数量最高;纤维降解菌的数量随精料增加呈下降趋势,且组间差异显著（P﹤0.05）,定量杂交方法和定量PCR方法也得到相同结果。F.succinogenes通过两种分子生物学方法检测受日粮影响均不显著,但在三株纤维分解菌中占绝对优势;R.albus和R.flavefaciens的定量PCR方法检测结果为Ⅱ组显著高于Ⅲ组（P﹤0.05）。随精料增加瘤胃pH呈下降趋势,组间差异显著（P﹤0.01）;氨氮和总挥发性脂肪酸浓度与之相反,Ⅲ组显著高于Ⅰ组和Ⅱ组（P﹤0.01）;乙酸摩尔浓度百分比随精料增加显著降低（P﹤0.05）,丙酸和丁酸摩尔浓度显著升高（P﹤0.05）。不同精粗比日粮对固相食靡流通速率、纤维物质的动态降解率影响不显著（p﹥0.05）。不同处理组之间各消化道部位的流通速率、消化率差异均不显著（p﹥0.05）,但纤维类物质在瘤胃的消化率表现为Ⅰ组高于Ⅱ组和Ⅲ组,整个消化道的比较结果3:7和1:9日粮高于5:5日粮。各组之间液相流通速率差异显著（p﹤0.05）,即3:7组数值较高,对瘤胃体积的影响不显著（p﹥0.05）。日粮精粗比变化对绵羊瘤胃液相纤维素酶影响不显著（p﹥0.05）;而对固相酶活有一定影响,结果为Ⅲ组果胶酶活显著高于Ⅰ组和Ⅱ组（p﹤0.05）,Ⅰ组滤纸酶活显著高于Ⅲ组（p﹤0.05）,固相酶活普遍比液相酶活高。2.不同氮源日粮对纤维降解菌群及纤维物质降解的影响试验选用12只体况良好、体重50公斤左右的苏尼特绵羊随机分为四组,每组3只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别饲喂氮源为葵粕+玉米蛋白粉、鱼粉、棉粕、豆粕的日粮。传统方法检测结果表明Ⅲ组瘤胃真菌数量显著高于Ⅱ组和Ⅳ组（P﹤0.05）;荧光实时定量PCR结果与之相一致。而瘤胃细菌组间差异不显著（P﹥0.05）;氮源对均毛虫、密毛虫、双毛虫、头毛虫影响显著（P﹤0.05）;对内毛虫、总纤毛虫数量影响极显著（P﹤0.01）,总体趋势为Ⅳ组纤毛虫多Ⅲ组少;Ⅲ组纤维分解菌显著高于Ⅱ组和Ⅰ组（P﹤0.05）。定量PCR法检测表明Ⅲ组F. succinogenes显著高于Ⅰ组（P﹤0.05）;R.albus和R. flavefaciens的数量受氮源影响不显著（P﹥0.05）。瘤胃pH受N源影响显著,其中Ⅲ组显著高于Ⅳ组（P﹤0.05）;对瘤胃NH3-N浓度、总VFA和丁酸的浓度影响不显著（P﹥0.05）,乙酸摩尔浓度百分比结果为Ⅱ组显著低于其它三组（P﹤0.05）,丙酸摩尔浓度百分比结果与之相反（P﹤0.01）。不同N源日粮对固相食靡流通速率、液相食靡流通速率、瘤胃体积、纤维物质的动态降解率影响均不显著（p﹥0.05）。瘤胃液相木聚糖酶活受N源影响显著（p﹤0.05）,其中Ⅱ组显著高于Ⅲ组和Ⅳ组（p﹤0.01）,Ⅲ组显著高于Ⅳ组（p﹤0.05）。瘤胃固相食靡果胶酶为Ⅲ组显著高于Ⅰ组（p﹤0.05）;糖苷酶为Ⅰ组显著高于Ⅱ组（p﹤0.05）,而与Ⅲ组、Ⅳ组差异不显著（p﹥0.05）;木聚糖酶的变化结果是Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅳ组均显著高于Ⅱ组（p﹤0.01）。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 瘤胃微生物种群的组成
• 1.2 瘤胃微生物种群的存在方式
• 1.3 瘤胃微生物降解纤维的机制
• 1.3.1 粗纤维的组成
• 1.3.2 瘤胃纤维分解菌降解纤维的过程
• 1.3.3 瘤胃微生物纤维素酶
• 1.4 瘤胃微生物种群间的相互作用
• 1.4.1 真菌和细菌间的关系
• 1.4.2 真菌和原虫间的关系
• 1.4.3 细菌间的关系
• 1.4.4 细菌和原虫间的关系
• 1.5 分子生物学方法在瘤胃微生物生态系统研究的应用
• 1.5.1 基因序列分析法在瘤胃微生物分类上的利用
• 1.5.2 PCR-DGGE 法在瘤胃微生物多态性研究中的应用
• 1.5.3 探针杂交法在微生物生态学中的应用
• 1.5.4 定量PCR 技术在瘤胃微生物定量研究中的应用
• 1.6 日粮对瘤胃微生物种群的影响
• 1.6.1 日粮结构对瘤胃菌群及纤维降解的影响
• 1.6.2 氮对瘤胃微生物的影响
• 1.6.3 其它因素对瘤胃微生物的影响
• 1.7 论文总体研究思路
• 2. 试验研究
• 2.1 不同精粗比日粮对瘤胃纤维降解菌群和瘤胃纤维物质降解的影响
• 2.1.1 传统培养法研究不同精粗比日粮对瘤胃纤维降解菌群的影响
• 2.1.1.1 材料与方法
• 2.1.1.2 结果与讨论
• 2.1.1.3 小结
• 2.1.2 分子生物学方法研究不同精粗比日粮对纤维降解菌群的影响
• 2.1.2.1 材料与方法
• 2.1.2.2 结果与讨论
• 2.1.2.3 小结
• 2.1.3 不同精粗比日粮对瘤胃生态系统发酵功能的影响
• 2.1.3.1 材料与方法
• 2.1.3.2 结果与讨论
• 2.1.3.3 小结
• 2.1.4 研究不同精粗比日粮对瘤胃内纤维素酶的影响
• 2.1.4.1 材料与方法
• 2.1.4.2 结果与讨论
• 2.1.4.3 小结
• 2.2.1 传统法研究不同N 源日粮对瘤胃纤维降解菌群的影响
• 2.2.1.1 材料与方法
• 2.2.1.2 结果与讨论
• 2.2.1.3 小结
• 2.2.2 分子生物学方法研究不同N 源日粮对瘤胃纤维降解菌群的影响
• 2.2.2.1 材料与方法
• 2.2.2.2 结果与讨论
• 2.2.2.3 小结
• 2.2.3 不同N 源对对绵羊瘤胃发酵功能的影响
• 2.2.3.1 材料与方法
• 2.2.3.2 结果与讨论
• 2.2.3.3 小结
• 2.2.4 研究不同N 源日粮对瘤胃内纤维素酶活的影响
• 2.2.4.1 材料与方法
• 2.2.4.2 结果与讨论
• 2.2.4.3 小结
• 3 论文的总体讨论和结论
• 3.1 总体讨论
• 3.1.1 日粮对瘤胃纤维降解菌群的影响
• 3.1.2 关于瘤胃微生物定量研究方法的评价
• 3.2 论文总体结论
• 3.3 需要进一步研究的问题
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介