IL-7R α 干预小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的初步研究

论文摘要

目的：1.利用近交系C57BL/6（H-2b,♂）小鼠作供鼠,SPF级BALB/C （H-2d,♀）小鼠作受鼠建立异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）小鼠模型。2.探讨外源性白细胞介素7受体a （IL-7Rα）与小鼠aGVHD的关系。方法：以BALB/C（H-2d）雌性小鼠为受者,将受鼠分组：单纯照射组（A组）、照射移植组（B组）、IL-7R a干预组（C组）,每组10只,均接受9Gy60Co进行全身照射,取C57BL/6（H-2b）雄性供鼠骨髓细胞1×107个和脾细胞2×107个经尾静脉输注给受鼠,检测以下相关指标的变化：（1）观察移植后受鼠的一般状况、生存时间；（2）观察外周血白细胞计数变化；（3）常规组织病理切片,HE染色,显微镜下观察肝脏、皮肽、脾脏及小肠的病理改变；（4）聚合酶链反应（PCR）检测嵌合体形成；（5）流式细胞仪分析T细胞亚群的变化；（6） Elisa法进行细胞因子IL-7水平的检测。结果：1.建立了稳定的小鼠aGVHD模型（1）不同组小鼠一般状况、生存期（观察30天）：A组（单纯照射组）小鼠体重持续下降,逐渐衰竭死亡,30天生存率为0.0%；B组（照射移植组）小鼠+6d体重降至最低,+13d上升,此后再次下降,且出现明显的aGVHD表现,30天生存率为50%；C组（IL-7Rα干预组）小鼠体重亦于+6d降至最低,此后渐升,+14d达最高后波动于此范围,并出现倦怠、纳差、脱毛、弓背等aGVHD表现,30天生存率为63.7%。（2）外周血白细胞变化：A组小鼠白细胞计数于+14d降至最低,且波动十此范围,至+20d全部死亡；B组和C组小鼠白细胞计数于+7d均降至最低,此后渐升。（3） aGVHD的病理学变化：A组小鼠未见aGVHD的病理学表现；C组小鼠可见轻度的aGVHD病理学表现；B组小鼠可见明显的aGVHD的病理学表现,肝脏可见肝细胞肿大,细胞结构不清,汇管区中央静脉和肝血窦有扩张及淤血,肝血.窦及汇管区有淋巴细胞浸润：皮肤结构破坏,毛囊减少,局部可见淋巴细胞浸润；脾脏标本脾小梁等正常结构破坏,间有巨噬细胞和淋巴细胞浸润,脾小体纤维化,脾细胞减少,部分可见脾窦扩张出血;小肠绒毛坏死脱落,腺体减少,淋巴细胞浸润。（4）嵌合体的检测：移植后+14天A组未检测出Y染色体,未移植,只行照射；B组和C组均有供鼠Y染色体检出,植入成功。2.IL-7R α蛋白对小鼠aGVHD的影响（1）两组小鼠的一般状况、生存期及生存率比较：C组小鼠生存期长于B组（P<0.05）,30天生存率高于B组（P<0.05）为63.7%；该组小鼠倦怠、纳差、脱毛、弓背等aGVHD表现轻于B组。（2）白细胞计数变化：C组和B组小鼠白细胞计数均于+7天降到最低值,此后渐上升,C组上升速度快,至+14天达（4.53±0.21）×109/L,白细胞恢复较B组为快（P<0.05）。（3）组织病理学检查：肝脏、脾、和皮肤的aGVHD组织病理学改变C组明显轻于B组,小肠标本C组与B组无明显差异。（4）嵌合体检测：移植后+14天,C组和B组均有嵌合体检出,两组植入都成功。（5）T细胞亚群恢复：移植后C组和B组小鼠T细胞亚群均紊乱,+21d后渐恢复,C组恢复较B组快,+21d CD3’T细胞计数两组有显著差异（P<0.05）。（6）移植前后血浆IL-7水平的变化：C组和B组小鼠IL-7浓度在移植后+7d血浆中的含量均较移植前显著增加,但随时间变化而逐渐下降；C组下降速度较B组快（P<0.05）。结论：1.建立了稳定的异基因骨髓移植后aGVHD小鼠模型；在aGVHD发生早期血浆IL7水平显著增高；2.外源性IL-7R α可降低血浆IL7水平,从而减轻异基因骨髓移植后aGVHD的发生。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 第二章 结果
• 2.1 异基因骨髓移植后AGVHD小鼠模型的建立
• 2.2 IL-7R A对小鼠AGVHD的影响
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附表
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 作者简历
• 致谢