土人参的组织培养

论文摘要

试验以土人参种子和腋芽或顶芽为材料,进行不定芽诱导、不定芽增殖、愈伤组织诱导、愈伤组织分化、试管苗的壮苗及生根的研究;并对试管苗的形态变化进行调查分析,初步建立了土人参快速繁殖体系,试验结果表明:1.取大田生长健壮土人参带腋芽茎段进行常规灭菌,获得无菌试管苗,利用无菌试管苗进行不同激素不同碳源的增殖试验及分化得到的再生试管苗进行继代以扩大繁殖,确定增殖率最高的试管苗增殖配方均为MS+NAA0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+食用白糖3%,达到256.7%和310%。2.在田间收集土人参的种子灭菌获得试管实生苗,用实生苗不同部位作为外植体,进行愈伤组织的诱导试验,确定诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,愈伤组织的诱导率也比较高,同时有少量芽分化,为43.3%。当添加不同浓度的硝酸银,分化率有提高,当硝酸银浓度5.5mg/L时分化率提高到76.7%,比不添加的配方提高33.4%,此时最佳的诱导配方是MS+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L+AgNO35.5mg/L。在进行不同外植体愈伤组织分化试验中,选用由叶片诱导的愈伤组织继代到第3代来进行分化试验,其芽分化率最适宜配方是MS+6-BA3.5mg/L+,此时分化率为最高达90.0%。3.将试管苗进行壮苗、生根的试验。结果表明:配方MS+BA2.5mg/L+MET1.0mg/L适合试管苗壮苗,培养的试管苗粗壮,叶色浓绿,将健壮试管苗转入1/2MS+NAA1.5 mg/L的生根培养基生根率为100%,平均每株生根数最高,为10.5条/株。4.试管苗形态调查的结果表明:分化培养基和壮苗培养基的形态异常率较高,为20.9%和20.6%,试管苗经过继代和生根培养后,形态异常率分别为16.3%和12.9%。生根培养可以使植株的形态异常率下降。在试管苗继代培养中,用叶片作为外植体的再生植株平均形态异常率最低,为26.8%,顶芽为和茎段的再生植株平均形态异常率都为31.3%。综上所述:通过土人参组织培养,已经建立了土人参快速繁殖体系。以土人参不同外植体快速繁殖试管苗,为实现组培苗大规模的工厂化生产或今后组织培养方法进行化学诱变育种提供可靠的理论依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 土人参的简介
• 1.1.1 土人参的生物学特性
• 1.1.2 土人参的药用价值和营养价值
• 1.2 土人参的农业生产状况
• 1.3 药食同源植物的组织培养发展
• 1.3.1 马齿苋科植物土人参的应用前景
• 1.3.2 国内研究现状
• 1.3.3 土人参组织培养的研究
• 1.4 本试验研究的目的、意义及创新之处
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 试验技术路线
• 2.2.2 不定芽增殖途径
• 2.2.3 不同外植体诱导愈伤组织
• 2.2.4 愈伤组织的分化
• 2.2.5 试管苗的增殖、壮苗和生根
• 2.3 培养条件
• 3 结果与分析
• 3.1 不定芽增殖途径
• 3.1.1 不同因素对诱导土人参不定芽增殖的影响
• 3.1.2 不同NAA浓度对丛生芽增殖的影响
• 3.1.3 6-BA不同浓度对不定芽增殖的影响
• 3.1.4 不同碳源类型及浓度对试管苗增殖的影响
• 3.2 器官发生型途径
• 3.2.1 多因素对诱导愈伤组织的影响
• 3.2.2 不同外植体对愈伤组织诱导产生的影响
• 3.2.3 NAA不同浓度对愈伤组织诱导的影响
• 3不同浓度对愈伤组织分化的影响'>3.2.4 AgNO₃不同浓度对愈伤组织分化的影响
• 3.3 愈伤组织的分化
• 3.3.1 不同细胞分裂素对愈伤组织分化的影响
• 3.3.2 不同世代的愈伤组织芽分化的差异
• 3.3.3 不同外植体的愈伤组织分化率差异
• 3.4 试管苗的继代、壮苗和生根
• 3.4.1 NAA和6-BA不同浓度配比对试管苗继代的影响
• 3.4.2 不同植物生长物质类型和浓度促进试管苗壮苗的试验
• 3.4.3 不同生长素类型和浓度促进试管苗生根的试验
• 3.6 再生植株形态异常的分析
• 3.6.1 不同培养基对植株形态异常的影响
• 3.6.2 不同外植体和继代次数对形态异常植株的影响
• 4 总结与讨论
• 4.1 关于土人参不定芽诱导及增殖的总结和讨论
• 4.2 愈伤组织的诱导和分化的总结和讨论
• 4.3 壮苗试验的总结和讨论
• 4.4 两种组培途径的比较
• 4.5 外植体类型对于组织培养过程中的影响
• 4.6 存在的问题与展望
• 4.6.1 存在的问题
• 4.6.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文