大鼠感觉神经元特异性受体在CFA炎症性疼痛中的作用机制

论文摘要

一氧化氮（nitro oxide, NO）、c-Fos蛋白、内源性阿片肽都表达于神经系统内,参与机体炎性疼痛的病理过程。大鼠感觉神经元特异性受体（rat Sensory neuron-specific receptors 1, rSNSRl）在完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant, CFA）炎症性疼痛中起镇痛作用。本实验应用rSNSRl受体的激动剂通过蛋白质印迹、免疫组织化学等实验方法,研究rSNSRl受体在CFA慢性炎症痛中的作用机制。研究发现在CFA炎性痛模型中,鞘内激活rSNSRl,导致脊髓神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthesis, nNOS）、c-Fos蛋白表达下调。同时,鞘内注射CTAP （D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2）减轻了rSNSR1的抗伤害作用。另外,在CFA炎性痛模型中,鞘内激活rSNSR1,背根神经节（Dorsal root ganglion, DRG）及炎症组织内,β-内啡肽（β-endorphin,β-EP）的表达基本不受影响。以上结果表明在CFA炎性痛模型中,鞘内激活rSNSR1产生的镇痛作用,可能是通过激活内源性阿片、抑制一氧化氮、c-Fos信号通路实现的,但与内源性阿片中的p-EP通路是否相关有待进一步研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 中文文摘
• 目录
• 绪论
• 1. 疼痛概述
• 1.1 从外周到中枢的疼痛传导通路
• 1.2 疼痛信息处理的初级中枢-脊髓
• 1.3 慢性疼痛
• 1.4 痛行为学试验的方法及观察指标
• 2. Mrg受体
• 2.1 Mrgs的分布特点
• 2.2 rSNSR1在伤害感受中的作用
• 3. 一氧化氮
• 3.1 nNOS的结构、分布和分类
• 3.2 NOS与疼痛
• 4. 阿片受体及其分布
• 4.1 G蛋白
• 4.2 阿片镇痛机制研究
• 5. 内源性阿片肽
• 5.1 内源性阿片肽的分布
• 5.2 内源性阿片肽的痛觉调控作用机制
• 6. c-fos原癌基因概述
• 6.1 Fos与疼痛
• 7. 本课题研究的立题背景与意义
• 第一章 材料与方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要实验仪器
• 1.2.1 行为学实验
• 1.2.2 western blot法
• 1.2.3 免疫组织化学反应法
• 1.3 主要实验试剂
• 1.3.1 行为学实验
• 1.3.2 western blot法
• 1.3.3 免疫组织化学反应法
• 2 实验方法
• 2.1 行为学实验方法
• 2.1.1 鞘内插管
• 2.1.2 动物的饲养与训练
• 2.1.3 实验分组及光电刺激热痛行为测试
• 2.2 western blot法
• 2.2.1 蛋白样品的制备
• 2.2.2 蛋白样品的定量
• 2.2.3 western blot的实验步骤
• 2.3 免疫组织化学反应（ABC法）
• 2.3.1 灌流取材及切片的制备
• 2.3.2 免疫组织化学反应步骤
• 3 数据统计分析
• 3.1 行为学实验
• 3.2 western blot实验
• 3.3 免疫组织化学反应
• 第二章 实验结果
• 2.1 蛋白样品定量结果
• 2.2 鞘内激活rSNSR1后,脊髓中nNOS的表达变化情况
• 2.3 鞘内激活rSNSR1后脊髓中Fos蛋白的表达变化情况
• 2.4 鞘内注射CTAP对CFA炎性大鼠伤害性热刺激缩脚潜伏期的影响
• 2.5 鞘内激活rSNSR1对炎症组织内β—EP表达的影响
• 2.6 鞘内激活rSNSR1对DRG内β-EP表达的影响
• 第三章 讨论与分析
• 3.1 鞘内激活rSNSR1后,脊髓中nNOS的表达明显减少
• 3.2 鞘内激活rSNSR1后脊髓中Fos蛋白的表达量明显减少
• 3.3 CTAP能减轻MSH在CFA诱发的炎症性疼痛中的抗伤害作用
• 3.4 鞘内激活rSNSR1,对炎症组织内、DRG内β-EP的表达没有影响
• 第四章 结论
• 附录
• 参考文献
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
• 致谢
• 个人简历