论文摘要
目的对黔产杜仲进行质量控制的研究,建立杜仲HPLC指纹图谱和HPCE指纹图谱分析方法,考察黔产杜仲质量的稳定性;探索建立杜仲质量控制的新方法;为杜仲质量标准的建立提供一定的实验依据。方法选取12批产贵州不同地理来源的杜仲药材进行研究,考察不同提取方法、料液比对提取杜仲药材中有效成分的影响,选取影响提取效率的三个主要因素提取溶剂,提取时间,提取次数,采用正交设计实验对质量分析测定的前处理工艺进行优化。分别采用高效液相色谱仪和高效毛细管电泳仪对杜仲进行指纹图谱分析,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2004年A版（国家药典委员会开发）对杜仲HPLC指纹图谱和HPCE指纹图谱进行评价,选取不少于10批具有代表性的杜仲药材,建立杜仲药材HPLC指纹图谱和HPCE指纹图谱的共有模式,分析不同地理来源的黔产杜仲药材的相似度,考察黔产杜仲的稳定性。在进行HPLC指纹图谱分析的同时建立杜仲药材有效成份含量测定的方法。采用内标法建立毛细管区带电泳测定杜仲药材中绿原酸含量的新方法。将具有代表性的杜仲药材按照2005版中国药典的盐制法进行盐制,对盐制品进行HPLC指纹图谱分析,建立盐制品HPLC指纹图谱共有模式,比较杜仲炮制前后HPLC指纹图谱共有模式的变化,从而反映杜仲炮制前后化学成分的变化。结果确定了对杜仲进行质量分析的前处理工艺为:5倍量60%乙醇对杜仲药材絮状粉末超声提取一次,提取时间为30min。建立了同时进行杜仲HPLC指纹图谱分析和指标成分含量测定的研究方法。12批黔产杜仲中有的2批HPLC指纹图谱相似度低于0.90,舍去后对剩下的10批杜仲药材及其盐制品进行相似度评价,杜仲药材相似度在0.9040.989之间,盐制品相似度在0.9040.999之间,并建立了10批杜仲药材及盐制品的HPLC指纹图谱共有模式,确定共有峰19个。杜仲药材松脂醇二葡萄糖苷和绿原酸的含量分别为1.042～4.47mg·g-1,0.053～2.435mg·g-1。建立杜仲HPCE指纹图谱的研究方法和杜仲药材中绿原酸HPCE含量测定方法。10批黔产杜仲HPCE指纹图谱相似度在0.9030.991之间。结论杜仲HPLC指纹图谱和HPCE指纹图谱分析方法操作简单,精密度高,重复性好,均都可用于杜仲质量的控制。黔产杜仲大部分质量稳定可控,少数产地杜仲质量存在差异有待进一步研究。HPCE分析方法简便,快速,分析成本低,在一定程度上弥补里高效液相色谱的不足,为杜仲质量控制提供了新的方法。