论文摘要
目的:观察瘦素在体外对人脂肪细胞分解代谢的急性及慢性影响,探讨瘦素对脂肪细胞脂肪蓄积的调节作用。方法:取成人皮下脂肪组织,常规提取和培养前脂肪细胞,待细胞融合后诱导分化为脂肪细胞,光镜下观察并经油红O染色证实后,把成熟脂肪细胞随机分为四组:正常对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组,分别培养于含瘦素浓度为0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml的培养液a中。分别在培养4h、48h、72h时收集培养液检测游离脂肪酸和甘油的浓度,取脂肪细胞经油红O染色后测定脂肪细胞中脂肪颗粒的积分光密度。对各组参数进行统计学分析以观察瘦素对成人脂肪细胞分解代谢的急性以及慢性影响。结果:1、瘦素作用4h后,与对照组相比,高浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度分别增加约312%(P<0.01)和17%(P<0.01),脂肪颗粒积分光密度减少约35%(P<0.01) ;低浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油浓度分别增加约87%(P<0.05)和5%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约12%(P<0.05);中浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油浓度分别增加约181%(P<0.05)和8%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约21%(P<0.05)。游离脂肪酸和甘油浓度与瘦素浓度正相关,脂肪颗粒积分光密度与瘦素浓度呈负相关。2、作用48h后,中浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度与对照组比较分别增加约334%(P<0.01)和31%(P<0.01),细胞中脂肪颗粒的积分光密度减少约46%(P<0.01);低浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度分别增加约94%(P<0.05)和16%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约18%(P<0.05);高浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度分别增加约252%和22%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约31%(P<0.05)。游离脂肪酸和甘油浓度、脂肪颗粒积分光密度与瘦素浓度无相关性。3、作用72h后时观察到,与对照组比较,中浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度与对照组比较分别增加约382%(P<0.01)和36%(P<0.01),细胞中脂肪颗粒的积分光密度减少约49%(P<0.01);低浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度分别增加约103%(P<0.05)和13%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约19%(P<0.015;高浓度组培养液中游离脂肪酸和甘油的浓度分别增加约259%(P<0.05)和24%(P<0.05),脂肪颗粒积分光密度减少约43%(P<0.05)。游离脂肪酸及甘油浓度、脂肪颗粒积分光密度与瘦素浓度无相关性。4、各组游离脂肪酸及甘油浓度、脂肪颗粒积分光密度与作用时间无相关性。结论:瘦素对脂肪细胞的急性作用及慢性作用均表现为促进分解代谢、减少脂肪蓄积。并且瘦素对脂肪细胞的急性作用具有剂量依赖性,慢性作用无剂量依赖性;瘦素对脂肪细胞代谢、脂肪蓄积的慢性调节作用无时间依赖性。瘦素对脂肪细胞存在自分泌调节作用,可能在肥胖发病机制中起重要作用。