论文摘要
为了开发饲用微生态制剂,本研究采用热水浸提法从新鲜菊芋中提取菊粉,作为部分试验材料,并对提取的菊粉进行了含量测定,研究了菊粉对2株乳酸菌生长的影响。然后采用平板活菌计数技术测定了乳酸菌的耐酸性、耐胆盐性、耐热性和贮存稳定性,通过牛津杯法观察乳酸菌的抑菌效果。并在实验室条件下,筛选了乳酸菌微胶囊化的包被方法、材料、工艺及参数,以提高其抗逆性。最后将菊粉和微胶囊化乳酸菌混合用于仔猪饲料中,测定其对仔猪生产性能和免疫功能的影响。结果表明:1.菊粉含量的测定采用还原糖的含量×0.9。还原糖的测定以果糖为标准物,按照3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法制作标准曲线,确定y=0.7564x-0.1107(R2=0.9998)为还原糖测定的回归方程。测得菊芋中菊粉含量为86.3%。2.在MRS液体培养基中添加不同比例的菊粉,37℃下密闭培养,测定乳酸菌生长的OD600nm值和pH值。结果显示1%菊粉添加量能促进植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的生长,但是随着菊粉添加量的增加,菊粉对乳酸菌的生长几乎没有影响。3.试验用植物乳杆菌的抗逆性不强,在pH值为1.5的人工胃液中不能存活,在pH值为2.5的人工胃液中处理2.5h后活菌数下降2个数量级以上;乳酸菌对温度的耐受性差,达到70℃时基本不生长;而对猪胆盐具有较好的耐受性,在胆盐质量分数为0.3%的MRS培养基中能够生长;常温下,菌液直接贮存存活率不高,15d后活菌含量下降2个数量级。该菌株对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有较强的抑制作用。4.对几种实验室常用的微胶囊化方法进行筛选,证实挤压法包被乳酸菌效果较好。海藻酸钠形成的凝胶具有肠溶胃不溶的特性,因此可作为微胶囊化的主要壁材。通过正交试验确定挤压法最佳的包被配方为:3%海藻酸钠、4%脱脂奶粉、6%乳糖、2%氯化钙,制备的微胶囊外形颗粒圆整,大小均匀,产品活菌数最高达7.76×1010cfu/g。经微胶囊化的乳酸菌其耐酸性和贮存稳定性均有较大提高。5.将菊粉和微胶囊化乳酸菌混合制成合生素,研究其对断奶仔猪的影响。结果表明,与对照组相比,乳酸菌组和合生素组日增重分别提高了19.63%(P<0.01)、24.85%(P<0.01),CD4+/CD8+分别提高了3.70%(P<0.05)、5.56%(P<<0.05),单核-巨噬细胞分别提高了12.21%(P<0.05)、13.17%(P<0.05)。
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