武夷岩茶对SPF级大鼠肠道菌群的影响

论文摘要

本研究旨在探讨武夷岩茶对SPF级大鼠肠道菌群及其代谢产物（短链脂肪酸和细菌酶）、血清生化指标（抗氧化和血脂）的影响,为深入研究武夷岩茶的营养保健作用提供新的思路和依据。选取20只SPF级雄性成年SD大鼠为研究对象,经过一周的适应期后,将其随机分成对照组和武夷岩茶组（n=10/组）,以自由摄取的方式为武夷岩茶组提供新鲜武夷岩茶茶水,并为对照组提供去离子水,实验持续9周。在适应期结束时（视为第0周）以及实验第6周、第9周结束时分别无菌采集大鼠新鲜粪便,对双歧杆菌、乳酸杆菌,肠球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌分别进行平板计数以观察其数量变化；采用DGGE分析粪便肠道菌群结构变化；采用高效液相色谱法测定粪便短链脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸）的浓度变化；采用酶联免疫法测定粪便细菌酶（p-葡萄糖醛酸酶和p-葡萄糖苷酶）的活性变化。实验结束时,将大鼠麻醉后进行心脏采血,观察其血脂和抗氧化指标的变化。动物实验结果显示：持续9周实验后,武夷岩茶组大鼠粪便大肠杆菌数量较对照组显著降低（P<0.05）,而双歧杆菌、乳酸杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌均没有显著性差异；DGGE图谱分析表明,9周后与对照组比较,武夷岩茶对SD大鼠肠道总菌群产生一定的影响,但尚不足以明显改变优势细菌种群的组成结构,而对乳酸菌类群的结构几乎无影响。武夷岩茶组大鼠粪便乙酸含量明显高于对照组（P<0.05）,而丙酸、丁酸、总SCFAs含量和pH值均无明显变化；武夷岩茶组大鼠粪便中p-葡萄糖醛酸酶活性较对照组下降14.66%,p-葡萄糖苷酶活性较对照组上升3.80%,但差异均不显著。实验9周结束后,武夷岩茶组大鼠血清甘油三酯（TG）含量较对照组下降18.42%,总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量与对照组基本相当,说明武夷岩茶对正常大鼠血脂代谢影响较小；武夷岩茶组大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性较对照组升高,丙二醛（MDA）含量较对照组降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）,说明武夷岩茶能提高大鼠抗氧化能力。综上,武夷岩茶可抑制大肠杆菌的增殖,对双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌无不良影响,可调节大鼠肠道内乙酸含量,并提高体内抗氧化水平,因此在日常饮用武夷岩茶可能具有改善肠道环境的潜在功效。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1.1 武夷岩茶概述
• 1.1.1 武夷岩茶的制造及功能成分
• 1.1.2 武夷岩茶的保健功效
• 1.2 肠道菌群研究进展
• 1.2.1 肠道菌群简介
• 1.2.2 肠道菌群对宿主健康的作用
• 1.2.3 肠道菌群的代谢产物
• 1.2.4 肠道菌群的分析方法
• 1.3 茶叶与肠道菌群
• 1.4 本研究的目的和意义
• 1.5 主要研究内容
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验流程
• 2.2 实验材料
• 2.3 试剂
• 2.4 仪器和设备
• 2.5 实验方法
• 2.5.1 实验动物
• 2.5.2 茶水制备
• 2.5.3 大鼠基本生理指标的测定
• 2.5.4 肠道菌群数量的检测——基于培养法
• 2.5.5 肠道菌群组成的检测——基于PCR-DGGE技术
• 2.5.6 肠道菌群代谢产物SCFAs含量及pH的测定
• 2.5.7 肠道菌群代谢产物细菌酶活性的测定
• 2.5.8 大鼠血清中血脂水平及抗氧化能力的测定
• 2.5.9 统计分析
• 第三章 结果与讨论
• 3.1 武夷岩茶对大鼠基本生理指标的影响
• 3.1.1 SD大鼠体重
• 3.1.2 SD大鼠饲料摄入量
• 3.1.3 SD大鼠液体饮用量
• 3.2 武夷岩茶对大鼠肠道菌群数量的影响
• 3.2.1 粪便主要菌群的数量变化
• 3.2.2 主要菌群的涂片镜检
• 3.2.3 讨论
• 3.3 武夷岩茶对大鼠肠道菌群组成的影响
• 3.3.1 肠道优势细菌PCR-DGGE结果
• 3.3.2 肠道乳酸菌类群PCR-DGGE结果
• 3.3.3 讨论
• 3.4 武夷岩茶对大鼠粪便短链脂肪酸和pH的影响
• 3.4.1 短链脂肪酸标准曲线的制作
• 3.4.2 大鼠粪便中SCFAs含量和pH值的变化
• 3.4.3 讨论
• 3.5 武夷岩茶对大鼠肠道代谢产物细菌酶的影响
• 3.5.1 细菌酶活性的测定结果
• 3.5.2 讨论
• 3.6 武夷岩茶对大鼠血脂的影响
• 3.6.1 血脂的测定结果
• 3.6.2 讨论
• 3.7 武夷岩茶对大鼠血清抗氧化能力的影响
• 3.7.1 丙二醛（MDA）
• 3.7.2 脂质过氧化物（LPO）
• 3.7.3 过氧化物歧化酶（SOD）
• 3.7.4 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）
• 3.7.5 过氧化氢酶（CAT）
• 3.7.6 总抗氧化能力（T-AOC）
• 3.7.7 讨论
• 结论与展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录1 ELISA试剂盒操作步骤
• 附录2 DNA提取试剂盒操作步骤
• 附录3 大鼠血脂水平汇总表
• 个人简历