论文题目: TiO2光催化氧化杀伤人胃肠癌细胞的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 化学工程与技术
作者: 张爱平
导师: 孙彦平
关键词: 光催化氧化,纳米薄膜,纳米溶胶,人胃肠癌细胞,杀伤效应,荧光染色法
文献来源: 太原理工大学
发表年度: 2005
论文摘要: 胃癌和结肠癌严重危害我国人民的健康,目前临床上的治疗方法主要有手术治疗法、放射治疗法、化学疗法等,手术治疗法只限于局部治疗,化学治疗和放射治疗均会产生大的副作用,寻求能有效治疗胃癌和结肠癌而对人体毒副反应小的治疗方法迫在眉睫。 TiO2光催化氧化杀伤癌细胞是一种探索中的治疗癌症的方法,到目前为止有关TiO2光催化氧化杀伤胃癌和结肠癌的研究尚未见报道。其原理是:在紫外光(λ<390nm)照射下,TiO2受光激发形成光生空穴-电子对。在空间电场的作用下,空穴与电子可被分离,并分别与水和溶解氧作用生成OH·,H2O2,HO2·等活性氧类。这些活性氧类与生物大分子反应,直接或通过一系列过氧化链式反应破坏生物结构,从而杀伤癌细胞。它具有常规治疗方法所不能替代的优点一安全、毒副作用小;微创、基本不伤害正常组织;除紫外光外不需要其它的外界能量,因此该法有望成为有效治疗胃癌和结肠癌而对人体毒副反应小的治疗方法,探索TiO2光催化氧化杀伤胃癌和结肠癌具有理论意义和实用价值。 以往TiO2光催化氧化杀伤癌细胞的研究中多采用台盼蓝排斥试验和集落形成试验检测癌细胞的存活率,台盼蓝排斥试验需在短时间内人工准确计数,否则部分活细胞也会着色,从而干扰测定。集落形成试验所需培养时间较长,涉及步骤多,容易引起误差。 为克服上述缺点,提高检测方法的速度和准确度,本研究采用每秒钟
论文目录:
第一章 文献综述与选题
1.1 半导体光催化的工作原理
1.2 半导体光催化剂的选择
1.3 活性氧类物质在TiO_2表面的形成机理
1.4 微生物的结构
1.4.1 细菌、病毒和真菌的结构
1.4.2 肿瘤细胞
1.4.3 细菌结构与肿瘤细胞结构比较
1.5 TiO_2光催化氧化杀灭微生物的研究进展
1.5.1 TiO_2光催化氧化杀灭细菌、真菌和病毒
1.5.2 TiO_2光催化氧化杀灭肿瘤细胞
1.6 TiO_2光催化剂的制备
1.6.1 TiO_2纳米粒子的制备
1.6.2 TiO_2薄膜的制备方法
1.7 TiO_2光催化杀伤微生物实验中的影响因素
1.7.1 TiO_2晶型的影响
1.7.2 粒径的影响
1.7.3 TiO_2含量的影响
1.7.4 TiO_2存在形式的影响
1.7.5 光源和光强的影响
1.7.6 微生物浓度的影响
1.7.7 气体成分及浓度的影响
1.7.8 活性氧类物质的影响
1.7.9 反应体系中微量有机物和无机物的影响
1.8 TiO_2光催化对微生物杀灭作用机理研究
1.8.1 细胞辅酶A的氧化机理
1.8.2 细胞渗透机理
1.8.3 内毒素的降解机理
1.8.4 蛋白质和脂类的变性分解机理
1.8.5 催化特异性DNA位置损害的机理
1.9 选题依据与主要研究内容
参考文献
第二章 人胃肠癌细胞培养
2.1 引言
2.2 人胃肠癌细胞培养基本原理
2.2.1 培养人胃肠癌细胞生长的条件
2.2.2 人胃肠癌细胞的传代培养
2.2.3 相差显微镜
2.2.4 人胃肠癌细胞活力的检测方法
2.2.5 流式细胞仪的工作原理
2.3 实验部分
2.3.1 药品与试剂
2.3.2 主要仪器
2.3.3 细胞株
2.3.4 细胞培养相关液体的配制
2.3.5 其它试剂
2.3.6 培养人胃肠癌细胞的实验步骤
2.4 本章小结
参考文献
第三章 TiO_2光催化剂的制备及表征
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 纳米TiO_2薄膜的制备与表征
3.2.2 纳米TiO_2溶胶的制备与表征
3.3 结果与讨论
3.3.1 涂覆法制备的TiO_2薄膜的XRD谱图
3.3.2 涂覆法制备的TiO_2薄膜的表面形貌
3.3.3 TiO_2溶胶粒子的TEM分析
3.3.4 TiO_2溶胶粒子粒径的测定
3.4 本章小结
参考文献
第四章 纳米TiO_2薄膜对人胃癌细胞的光杀伤效应
4.1 实验方法
4.1.1 人胃癌细胞(BGC-823)的培养
4.1.2 涂覆法制备TiO_2薄膜
4.1.3 TiO_2薄膜的XRD分析和SEM分析
4.1.4 实验分组及处理
4.1.5 倒置相差显微镜观察
4.1.6 BGC-823细胞存活能力判定
4.1.7 流式细胞仪鉴别死活细胞的碘化丙啶荧光染色法
4.1.8 纳米TiO_2薄膜光催化氧化杀伤BGC-823细胞的实验装置图
4.1.9 纳米TiO_2薄膜光催化氧化杀伤BGC-823细胞的实验步骤
4.2 实验结果与讨论
4.2.1 涂覆法制备的TiO_2薄膜的XRD谱图
4.2.2 纳米TiO_2薄膜的SEM分析
4.2.3 倒置相差显微镜观察BGC-823细胞TiO_2光催化氧化前后形态变化
4.2.4 流式细胞仪测定存活率测定结果
4.3 本章小结
参考文献
第五章 纳米TiO_2薄膜表面分形结构对光催化氧化杀伤胃癌细胞的影响
5.1 实验
5.1.1 纳米TiO_2薄膜的制备
5.1.2 纳米TiO_2薄膜的表征
5.1.3 BGC-823细胞培养及细胞存活率的测定
5.1.4 纳米TiO_2薄膜表面分形维数的测定
5.2 结果与讨论
5.2.1 TiO_2薄膜的XRD和SEM分析
5.2.2 纳米TiO_2薄膜对BGC-823细胞的光催化氧化杀伤结果
5.2.3 不同TiO_2比负载量对BGC-823细胞光催化氧化杀伤效果的影响
5.3 结论
参考文献
第六章 纳米TiO_2薄膜光催化氧化对人胃癌细胞周期的影响
6.1 仪器及试剂
6.2 实验方法
6.2.1 涂覆法制备纳米TiO_2薄膜
6.2.2 BGC-823细胞培养
6.2.3 实验设计和处理
6.2.4 细胞周期的测定
6.3 紫外光激发TiO_2对BGC-823细胞体外凋亡及细胞周期的影响
6.4 本章小结
参考文献
第七章 纳米TiO_2溶胶对人结肠癌细胞的光杀伤研究
7.1 实验方法
7.1.1 结肠癌细胞(Ls-174-t)的培养
7.1.2 纳米TiO_2溶胶的制备
7.1.3 TiO_2溶胶的预处理
7.1.4 纳米TiO_2溶胶的表征
7.1.5 纳米TiO_2溶胶对Ls-174-t细胞的杀伤处理与分组
7.1.6 人结肠癌细胞存活率的测定
7.2 实验结果与讨论
7.2.1 TiO_2溶胶粒子的透射电镜(TEM)分析
7.2.2 TiO_2溶胶粒子粒径的测定
7.2.3 纳米TiO_2溶胶粒子对人结肠癌细胞的光杀伤效应
7.3 本章小结
参考文献
第八章 总结与设想
8.1 总结
8.2 论文创新点
8.3 今后工作设想
附录1 培养用品的清洗
附录2 消毒灭菌的方法
附录3 细胞的冻存和复苏
附录4 培养细胞的运输
附录5 相差显微镜的使用方法
附录6 微孔滤膜滤器的结构及使用方法
附录7 培养室内的无菌操作
作者简介
致谢
博士研究生期间论文发表情况
博士学位论文独创性说明
发布时间: 2005-11-14
参考文献
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