乌贼墨—黄芪合剂缓解化疗副作用研究

论文摘要

目的:环磷酰胺（cyclophosphamide,CP）是临床上常用的免疫抑制剂和抗肿瘤药物,由于其在体内能转化成具有细胞毒活性的烷基化物,而产生如骨髓抑制、胃肠道反应、脱发等毒副作用,尤其是对胚胎及精子的致畸作用,使其临床应用受到了限制。乌贼墨是一种有着诸多生理活性的天然产物,目前对其中的蛋白多糖复合体和黑色素的功能研究已有诸多报道。我们的前期研究发现,乌贼墨在缓解化疗副作用方面具有较强功效。研究证实,传统中医药在缓解化疗副作用方面效果显著,但中药的药效效果往往是由多种药物协同作用而产生的。因此,本研究从中药配伍理论出发,将乌贼墨与黄芪按一定比例制成对药。通过对小鼠腹腔注射环磷酰胺建立化疗损伤模型,再用灌喂乌贼墨-黄芪对药的方式予以治疗。对几种脏器和血液学指标进行检测与评估,探讨乌贼墨-黄芪对药对环磷酰胺毒副作用的缓解效果及其可能的作用机制,为乌贼墨的开发与利用提供理论依据。方法:40只健康的昆明种小鼠,随机分为5组,模型组、乌贼墨组、黄芪组、合药低剂量组和合药高剂量组,试验周期（15天）结束后,检测外周血象,骨髓DNA含量,肝脏和脾脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。72只健康的昆明种小鼠,随机分为9组:对照组,模型组,乌贼墨组,黄芪组和5个不同配比的对药治疗组。试验周期（15天）结束后,检测体重、外周血象、骨髓DNA含量、脏器指数及肝脏和脾脏组织中SOD活性和MDA含量。70只健康的昆明种小鼠,随机分为7组,对照组,模型组,5个不同剂量组,试验周期结束后（15天）,检测外周血象、骨髓DNA含量,脏器指数及血清中过氧化氢酶和乳酸脱氢酶活性。84只健康的昆明种小鼠,随机分为7组,对照组,大剂量环磷酰胺损伤（450mg/kg）模型组,乌贼墨组,黄芪组,3个不同剂量组。试验周期结束后（15天）,检测外周血象、脏器指数、骨髓DNA含量、肝脏脾脏和肾脏指数、血清中过氧化氢酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性及尿素氮含量。结果:（1）乌贼墨和黄芪都可以明显改善因注射环磷酰胺引起的骨髓抑制,乌贼墨与黄芪共同作用,表现出一定的协同效应,骨髓DNA含量、白细胞、红细胞、血小板和血红蛋白比两种药物单独使用效果有所提升。肝脏和脾脏组织细胞的氧化损伤程度也较单用药时有所减轻。（2）不同配伍比例的乌贼墨-黄芪合剂在缓解环磷酰胺引起的化疗损伤方面有不同的作用效果,当乌贼墨黄芪配伍比例为1:2时,作用效果最好。与对照组相比,最优配比组红细胞、血小板、血红蛋白显著回升（P<0.05）,分别增加50.4%、40.3%和35.9%。骨髓DNA含量增加58.5%（P<0.01）,肝脏和脾脏组织中SOD活性分别升高26.3%和62.2%（P<0.01）,MDA含量分别降低25.2%和22.1%（P<0.01）。（3）乌贼墨黄芪合剂缓解化疗损伤的效果呈现明显的量效关系,药物浓度在生药1g/mL时效果达到最大。小鼠体重、红细胞、血红蛋白、血小板、骨髓DNA含量、血清中过氧化氢酶和乳酸脱氢酶活性均随用药量的增加而升高（P<0.05）),当用量超过生药1g/mL,即生药8g/kg体重时,药效却随着药量的增加而下降。（4）乌贼墨-黄芪合剂对大剂量环磷酰胺（450mg/kg）引起的严重化疗损伤有一定的缓解作用,可使小鼠的存活率提升近30%;也可明显改善化疗引起的体重下降（P<0.01）,最高可使体重增加13.3%;同时对环磷酰胺引起的血清中几种代谢相关酶活性变化异常有明显的抑制作用:过氧化氢酶活性增加84.7%,乳酸脱氢酶、肌酸激酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性分别降低21.4%、31.8%、50.8%和46.9%,血尿素氮含量降低31.0%。结论:乌贼墨黄芪合剂对环磷酰胺引起的化疗损伤有具有一定程度的修复作用,不同配伍比例、不同药物用量效果不同,乌贼墨与黄芪在1:2配比效果最佳,用药量在生药8g/kg体重为宜,用药浓度太大则药效下降,同时可明显缓解高剂量环磷酰胺引起的严重化疗损伤。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 试剂清单
• 试验仪器及设备一览表
• 1 引言
• 1.1 乌贼墨化学成分及性质
• 1.2 乌贼墨的药理作用研究
• 1.2.1 乌贼墨的抗肿瘤活性
• 1.2.2 乌贼墨的抗辐射作用
• 1.2.3 乌贼墨的凝血活性
• 1.2.4 乌贼墨对造血机能的影响-升高白细胞作用
• 1.2.5 乌贼墨抗菌活性
• 1.2.6 乌贼墨的抗氧化作用
• 1.2.7 乌贼墨的其他作用
• 1.3 黄芪的药理作用
• 1.4 中药制剂药对的研究意义和影响因素
• 1.5 中药制剂缓解化疗副作用的研究现状
• 1.5.1 中药缓解化疗副作用研究意义
• 1.5.2 化疗药物所致骨髓抑制的防治
• 1.5.3 化疗药物所致消化道反应的治疗
• 1.5.4 化疗所致肌体免疫功能损伤的防治
• 1.5.5 化疗药物肾毒性的防治
• 1.5.6 化疗引起脱发的药物防治
• 1.6 研究的目的意义及研究内容
• 1.6.1 研究的目的和意义
• 1.6.2 研究的主要技术路线
• 2 乌贼墨制剂缓解化疗副作用可行性研究
• 2.1 前言
• 2.2 试验材料和方法
• 2.2.1 乌贼墨的制备
• 2.2.2 实验设计
• 2.2.3 小鼠外周血象的测定
• 2.2.4 骨髓细胞DNA 含量的测定
• 2.2.5 小鼠肝、脾脏指数及抗氧化能力测定
• 2.2.6 数据分析
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 对外周血象的影响
• 2.3.2 对骨髓DNA 含量的影响
• 2.3.3 对小鼠肝脏指数及抗氧化能力的影响
• 2.3.4 对小鼠脾脏指数及抗氧化能力的影响
• 2.4 讨论
• 3 不同配比乌贼墨黄芪制剂的化疗保护作用
• 3.1 前言
• 3.2 试验材料和方法
• 3.2.1 试验设计原理
• 3.2.2 试验材料
• 3.2.3 实验设计
• 3.2.4 小鼠外周血象的测定
• 3.2.5 骨髓细胞DNA 含量的测定
• 3.2.6 小鼠肝、脾指数及抗氧化能力测定
• 3.2.7 数据分析
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 对外周血象的影响
• 3.3.2 对骨髓DNA 含量的影响
• 3.3.3 对肝脏指数及抗氧化能力的影响
• 3.3.4 对脾脏指数及抗氧化能力的影响
• 3.4 讨论
• 4 不同剂量乌贼墨黄芪制剂的化疗保护作用
• 4.1 前言
• 4.2 试验材料和方法
• 4.2.1 试验设计
• 4.2.2 小鼠外周血象的测定
• 4.2.3 小鼠体重和脏器指数的测定
• 4.2.4 骨髓细胞DNA 含量的测定
• 4.2.5 小鼠血清中部分酶活性的测定
• 4.2.6 数据处理
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 对外周血象的影响
• 4.3.2 体重和脏器指数的变化
• 4.3.3 骨髓DNA 含量的变化
• 4.3.4 小鼠血清中部分酶活性的变化
• 4.4 讨论
• 5 乌贼墨制剂对严重化疗损伤小鼠的保护作用
• 5.1 前言
• 5.2 试验材料和方法
• 5.2.1 试验程序设计
• 5.2.2 小鼠外周血象的测定
• 5.2.3 小鼠体重和脏器指数的测定
• 5.2.4 骨髓细胞DNA 含量的测定
• 5.2.5 小鼠血清中部分酶活性的测定
• 5.2.6 数据处理
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 对外周血象的影响
• 5.3.2 小鼠存活率、体重和脏器指数的影响
• 5.3.3 骨髓DNA 含量的变化
• 5.3.4 小鼠血清中部分酶活性的变化
• 5.4 讨论
• 6 结论与展望
• 6.1 结论
• 6.2 创新点
• 6.3 展望
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 导师简介