基于血清药物化学的仙鹤草质量标准研究

论文摘要

仙鹤草（Agrimonia pilosa Ledeb）又名龙牙草,是蔷薇科多年生草本植物龙牙草的干燥地上部分,是一味常用中药。主要功效为收敛止血、止痢、补虚杀虫。现代医学研究表明,具有抗凝血、镇痛、强心、降压、降血糖、抗菌和抗血栓形成等作用。临床上主要用于各种出血症、糖尿病、消化道溃疡、肿瘤、心律失常、慢性肝硬化等疾病的治疗。全草中含有三萜皂苷类、黄酮类、酚类、鞣质类、糖苷类、内酯类和有机酸类等。最新研究表明,将仙鹤草作为君药用于中药复方中对治疗脑动脉硬塞性眩晕以及痴呆、脑血栓的防治,取得明显疗效。本文采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）方法对仙鹤草提取物进行血清药物化学研究。首先,对仙鹤草的提取工艺进行研究,结合提取率和液相色谱图,选择水提80%醇沉法为最优的仙鹤草提取方案。其次,进行了仙鹤草体外成分分析方法的研究,采用Hypersil ODS2色谱柱,以乙腈-0.005mol/L乙酸铵水溶液梯度洗脱（时间→乙腈%）：（0-3）→（6-3）→（9-7）→（35-15）→（40-15）→（42-60）→（44-70）→（50-100）为流动相,检测波长280nm,流速为1.0ml/min,柱温20℃。在此色谱条件下建立仙鹤草的HPLC-DAD谱图,结合对照品相对保留时间、紫外吸收光谱和LC/MS定性出儿茶素和金丝桃苷。然后,利用所建立体外成分分析方法,对仙鹤草提取物进行血清药物化学研究。对比空白、体内外液相谱图,在给药后0-5h血清中共检测到18个血中移形成分,其中儿茶素、金丝桃苷、h及i号化合物吸收入血,另有4个成分可能以原形入血,10个成分为其给药后代谢成分或是应激性物质。儿茶素和金丝桃苷在吸收入血成分当中,故推测儿茶素和金丝桃苷为仙鹤草有效活性成分。最后,以儿茶素和金丝桃苷为分析对象,建立同时测定方法对仙鹤草的质量标准进行研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 仙鹤草背景资料介绍
• 1.2 中药血清药物化学背景资料介绍
• 1.3 本课题研究的内容
• 第二章 仙鹤草提取工艺的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 色谱条件的选择
• 2.2.3 样品的配制
• 2.2.4 提取方法选择与结果
• 2.2.4.1 溶剂选择
• 2.2.4.2 除杂溶剂选择
• 2.2.4.3 除杂溶剂配比选择
• 2.3 讨论
• 第三章 仙鹤草血清药物化学研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 色谱条件
• 3.2.3 研究对象
• 3.2.4 空白血清及含药血样的制备
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 仙鹤草提取物的色谱条件
• 3.3.2 检测波长的选择及结果
• 3.3.3 仙鹤草部分成分归属
• 3.3.4 大鼠血清中仙鹤草提取物的HPLC-DAD测定
• 3.4 小结与讨论
• 第四章 仙鹤草中儿茶素和金丝桃苷的含量测定
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 样品制备
• 4.2.3 色谱条件
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 儿茶素、金丝桃苷同时测定研究
• 4.3.1.1 色谱条件与系统适应性
• 4.3.1.2 线性关系考察
• 4.3.1.3 精密度试验
• 4.3.1.4 重复性试验
• 4.3.1.5 稳定性试验
• 4.3.1.6 定量限和检测限
• 4.3.1.7 含量测定
• 4.3.1.8 加样回收率试验
• 4.4 小结
• 结果与展望
• 参考文献
• 硕士期间已发表和待发表的学术论文
• 致谢