电刺激C2C12收缩运动对自由基代谢影响的实验研究

论文摘要

大量研究表明,运动应激引起自由基生成迅速增加。由于自由基高度的活泼性与极强的氧化能力,能通过氧化作用来攻击其所遇到的许多生物分子,使机体内大分子物质产生过氧化反应,从而引起细胞结构特别是供能的线粒体结构和机能的破坏,导致组织细胞损害,当然机体抗氧化系统也会产生相应变化。然而由于方法学的限制,对于运动训练中骨骼肌ROS生成的直接证据较少,多是在分离组织后,通过测定脂质过氧化物（MDA）和DNA损伤产物而间接反映活性氧水平,而无法直接定量测定活性氧,也无法了解刺激引起的ROS变化的时相性和收缩强度的量效性。本实验利用培养的C2C12细胞,电刺激使其产生收缩运动,以二氯荧光素为探针,利用荧光分光光度计实时检测C2C12细胞内活性氧的变化,并对活性氧引起的线粒体脂质过氧化物MDA,氧化酶SOD Na+,K+-ATPase活性等指标进行检测,以观察线粒体的抗氧化系统产生的变化,初步探讨收缩引起ROS变化的时相性。 实验结果显示: 1.以45V、20ms、5Hz的强度刺激肌管,细胞内ROS生成迅速增加,在刺激60min时,ROS的量达到最高,然后缓慢下降,继续刺激到120min时,ROS释放再次升高。随后迅速下降。表明电刺激骨骼肌收缩能引起细胞内ROS生成增加,且在不同的时间点,增加的量不同。 2.电刺激肌管时线粒体内SOD活性逐渐升高,至150min和180min时都与对照组相比有显著性差异。脂质过氧化物MDA量在90min时略有升高,随后下降,但无显著性差异。表明肌管收缩能引起线粒体内SOD活性持续升高,但对MDA的影响却不太。 3.电刺激肌管引起胞浆内Na+,K+-ATPase活性升高,刺激至150min时活性下降,且刺激到180min时下降的很低。表明骨骼肌长时间收缩运动引起Na+,K+-ATPase活性的降低。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 1.1 文献综述
• 1.1.1 骨骼肌成肌细胞C2C12及其在运动医学研究中的应用
• 1.1.2 C2C12细胞在运动医学中的应用
• 1.1.3 电刺激方法的应用
• 1.1.4 自由基及其代谢研究进展
• 1.2 选题依据
• 2 实验正文
• 2.1 材料和方法
• 2.2 统计处理
• 3 实验结果
• 4 分析与讨论
• 4.1 肌管长时间收缩运动对ROS生成的影响
• 4.2 肌管长时间收缩运动对MDA和SOD的影响
• +-K⁺-ATPase活性的影响'>4.3 肌管长时间收缩运动对Na⁺-K⁺-ATPase活性的影响
• 5 结论
• 6 参考文献
• 7 致谢
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