论文摘要
目的:探讨罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织中磷酸化IKK及其下游产物IκBα表达的影响,为其在糖尿病肾病的临床治疗提供理论依据。方法:选用近交、清洁级雄性Wistar大鼠48只,体重180-220g,随机分为对照组（C组,n=16只）、糖尿病组（DM组,n=16只）、罗格列酮干预组（R组,n=16只）。禁食12小时后,DM组和R组一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）50mg/kg（用0.1mol/L的枸橼酸缓冲液新鲜配制,PH 4.5）,C组仅注射等体积枸橼酸缓冲液。72小时后至少连续三天断尾采血检测血糖,以连续三次血糖≥16.7mmol/L为糖尿病模型造模成功。各组于成模3天后给药,R组给予5mg.kg-1.d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,C组和DM组给予等体积生理盐水灌胃。于干预治疗的8周和12周各组取8只大鼠,称重后分别用代谢笼收集24小时尿;麻醉后心脏取血,分离血清,用作生化指标的检测;切取肾脏,去掉被膜,用滤纸吸干后称重,切取部分肾脏组织固定、包埋,制备病理切片和超薄切片,在光镜和透射电镜下观察肾小球超微结构的改变,并将肾脏组织用免疫组化和图像分析系统检测磷酸化IKK和磷酸化IκBα的定位、半定量表达。结果:1、注射STZ 72小时后,糖尿病组和罗格列酮干预组大鼠血糖显著增高,与对照组比较有统计学意义（p<0.01）。糖尿病组和罗格列酮干预组大鼠在注射STZ后空腹血清C肽显著低于对照组,有统计学意义（p<0.01）。2、8、12周时,与对照组比较,糖尿病组和罗格列酮干预组大鼠24小时尿白蛋白排泄量增高,差异有统计学意义,而罗格列酮干预组大鼠24小时尿白蛋白排泄量显著低于糖尿病组,差异有统计学意义;糖尿病组大鼠24小时尿白蛋白排泄量随病程延长增加;罗格列酮干预组大鼠24小时尿白蛋白排泄量随疗程延长减少。3、光镜可见,糖尿病组大鼠肾小球体积早期增大,毛细血管基底膜增厚,肾小管上皮细胞空泡变性,罗格列酮干预组上述病理改变减轻。4、电镜可见,与对照组比较,糖尿病组和罗格列酮干预组大鼠肾小球毛细血管基底膜不均匀增厚,足突融合,系膜区扩张;与糖尿病组相比,罗格列酮干预组的上述病理改变显著减轻。5、免疫组化半定量分析显示,对照组大鼠肾小球和肾小管均有少量磷酸化IKK、磷酸化IκBα表达。8、12周时,与对照组比较,糖尿病组和罗格列酮干预组大鼠肾组织中磷酸化IKK及磷酸化IκBα表达增加,但罗格列酮干预组大鼠肾组织中磷酸化IKK及磷酸化IκBα表达显著低于糖尿病组,并随着疗程的延长有下降趋势。结论:罗格列酮能减少链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织中磷酸化IKK和磷酸化IκBα的表达,能明显减少该模型的尿蛋白,对肾脏有保护作用,其机制可能为罗格列酮与其配体PPAR-γ结合后,抑制IKK复合体的磷酸化,进而抑制IκB蛋白的降解,最终抑制NF-κB的活化,减轻肾脏病理损害,达到改善糖尿病肾病的目的。