论文摘要
研究背景:已经知道,高浓度氧（high-concentration oxygen,HO）,对新生动物的眼和肺有毒性作用,即可引起早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurit,ROP）和支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）。高压氧（hyperbaric oxygenation,HBO）同样属于高浓度氧,但经文献复习,用常规条件的HBO治疗缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）并不导致新生儿和新生动物的ROP和BPD。HBO和HO对正常的新生大鼠的毒性作用有否区别,尚未见到报道。弄清楚两者之间的区别及其机制将有助于临床将HBO更好地用于新生儿脑损伤的治疗。目的:观察HBO与HO对不同日龄正常新生大鼠视网膜和肺组织的毒性作用以及血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）表达的变化.方法:1.动物分组及处理:将3日龄和7日龄的Sprague-Dawley大鼠（性别随机）随机分为以下6组:3日龄正常对照组（CON-3）,3日龄高浓度氧组（HO-3）,3日龄高压氧组（HBO-3）,7日龄正常对照组（CON-7）,7日龄高浓度氧组（HO-7）,7日龄高压氧组（HBO-7）。HBO组给予高压氧（2.0ATA）处理,每日一次,连续7d后在常压空气下饲养;HO组给予高浓度氧处理（氧浓度为90%）,连续7d后在常压空气下饲养;正常对照组不予任何干预。模型成功后于鼠龄21d处死所有大鼠。2.墨汁染色视网膜铺片观察视网膜新生血管;眼球及肺组织病理学检查:6组大鼠眼球及肺组织做HE染色,光镜下观察眼球视网膜增生血管芽数,肺组织形态学变化;血管内皮生长因子（VEGF）的免疫组化:观察视网膜及肺组织VEGF的表达情况并行半定量分析;肺组织细胞凋亡（TUNEL）检测并定性分析。结果:CON-3组,CON-7组视网膜血管新生血管芽细胞核计数平均分别为19.0±4.8个,20.1±8.0个,HBO-3组为23.6±6.8个,HO-3组为82.4±15.4个,HBO-7组为20.9±7.8个,HO-7组为68.8±12.7个。与同日龄CON组相比,HBO组差异无统计学意义,P＞0.05;HO组新生血管细胞核增多,差异有非常显著意义,P＜0.005;不同日龄HO组比较,P=0.009,HO-3组新生血管细胞增生较HO-7组明显。视网膜铺片显示HBO组较CON组无明显血管增生现象,而HO组视网膜血管明显增生。视网膜VEGF免疫组化可见CON-3组,CON-7组,HBO-7组均有微弱表达,而HBO-3组,HO-3组,HO-7组则明显表达,差别有统计学意义,P＜0.001。肺组织HE染色光学显微镜下观察;HBO组与正常对照组基本相同,为正常肺结构。而不同日龄HO组肺泡样结构不规则,大量肺泡融合萎缩,肺泡数量减少,肺间隔增厚,少量胶原沉积及成纤维组织增生。肺组织VEGF免疫组化可见不同日龄CON组,HBO组表达无明显差异;与CON组比较,HO组肺组织VEGF表达减少,P＜0.05,有统计学意义;不同日龄之间比较,HO-3组肺组织VEGF表达减少较HO-7组明显,P＜0.05。肺组织TUNEL结果显示HO组可见大量凋亡细胞,HBO-3有部分凋亡细胞可见,HBO-7组同CON组无明显差别。结论:HO有刺激正常新生大鼠视网膜血管增生和肺组织损伤作用,而HBO无此种作用,其原因可能和VEGF的表达有关;动物出生后越早给予HO干预,其新生大鼠视网膜血管增生和肺组织损伤作用越明显。
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